产品分类

本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】:鲍样病毒PCR检测试剂盒说明书

【英文名称】:Abalone Herpeslike Virus(AbHV)PCR

【货号】:BKP3210

【储存条件及有效期】:

-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。

【适用仪器】:

ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。

【样本采集、存放及运输】

u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；

u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；

u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。

【自备试剂】:

核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

1、酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

鲍样病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。

(2) 灵敏度高

PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。

(3) 简便、快速

PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。

(4) 对标本的纯度要求低

不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

Mouse 17-ANP ELISA Kit 96T/48T 小鼠17-羟-孕酮(17-ANP)

Mouse T3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠三碘甲状腺原氨酸(T3)

Mouse T4 ELISA Kit 96T/48T 小鼠甲状腺素(T4)

Mouse Free-T4 ELISA Kit 96T/48T 小鼠游离甲状腺素(Free-T4)

Mouse Free-T3 ELISA Kit 96T/48T 小鼠游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)

Mouse NN-T4 ELISA Kit 96T/48T 小鼠新生甲状腺素(NN-T4)

Mouse Insulin ELISA Kit 96T/48T 小鼠胰岛素(Insulin)

Mouse C-Peptide ELISA Kit 96T/48T 小鼠C-肽(C-Peptide)

Mouse ATH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促肾上腺激素皮质激素(Mouse ATH)

Mouse HCG ELISA Kit 96T/48T 小鼠绒毛激素(HCG)

Mouse LH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促黄体激素(LH)

Mouse FSH ELISA Kit 96T/48T 小鼠促卵泡生长激素(Mouse FSH)

Mouse Prolactin ELISA Kit 96T/48T 小鼠促乳素(Prolactin)

Mouse Soluble CD30 ligand ELISA Kit 96T/48T 小鼠CD30配体(sCD30 L)

ACE2  紧张素转换酶2抗体 0.1ml

ACEI  紧张素1转换酶抑制剂抗体 0.1ml

Acetyl CoA Carboxylase  乙酰辅酶A羧化酶抗体 0.2ml

Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79)  磷酸化乙酰辅酶A羧化酶抗体 0.1ml

ACD  肾上腺皮质发育异常蛋白抗体 0.2ml

ACHE/Acetylcholinesterase  乙酰胆碱酶抗体 0.1ml

Acinus  Acinus抗体 0.2ml

phospho-Acinus(Ser1180)  磷酸化腺泡Acinus蛋白抗体 0.1ml

Ack1  醋酸激酶1抗体 0.2ml

Phospho-Ack1(Tyr859/860)  磷酸化Ack1抗体 0.1ml

Phospho-Ack1(Tyr284)  磷酸化Ack1抗体 0.1ml

Phospho-Ack1(Tyr326)  磷酸化Ack1抗体 0.1ml

ACSL1  长链脂肪酸辅酶A连接酶1/2抗体 0.2ml

ACTH (1-39)  促肾上腺皮质激素(1-39)抗体 0.1ml

Phospho-MKP1 (Ser318)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1抗体 0.1ml

ACTH (18-39)  促肾上腺皮质激素ACTH(18-39)抗体 0.1ml

ACTH (7-23)  促肾上腺皮质激素ACTH (7-23)抗体 0.1ml

Actin α/alpha-SMA  肌动蛋白α(α-SMA)抗体 0.1ml

Sarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α横纹肌辅肌动蛋白/α-SCA抗体 0.1ml

鲍样病毒PCR检测试剂盒说明书alpha Actinin 4  α-辅肌动蛋白4抗体 0.2ml

F-Actin  纤维状肌动蛋白抗体 0.1ml

ACOT8  酰基辅酶A硫酯酶8 0.2ml

Agpat2  溶血磷脂酸酰基转移酶β抗体 0.2ml

PCR检测试剂盒：

(一)总RNA提取

取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。

(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。

(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。

(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。

(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。

(5)4oC 12000g离心15min。

(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。

(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。

(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。

(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。

(10)4oC 11000g离心5min。

(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。

(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。

(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。

(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。