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鸭病毒染料法荧光定量PCR试剂盒
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P64740
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2021-01-15
  • 更新日期: 2024-04-24
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P64740
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 %
规格 50次
是否进口



公司产品仅用于科研实赭曲霉   绿色木霉=木素木霉
苏云金芽胞杆菌苏云金变种Bacillusthuringeinsissubsp.thuringeinsis   鲁氏酵母  甜酱酵母
铜绿假单胞菌ATCC27853冻干粉   鲁氏酵母  酱油酵母
出芽短梗霉   罗斯酵母
烟酸芽孢杆菌   苏云金芽胞杆菌云南亚种Bacillusthuringiensissubsp.yunnanensis
长野解普鲁兰杆菌   紫晶口磨
(萨氏曲霉)
验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl     dNTP mix
2mM
4 μl
引物110pM
2 μl
引物210pM
2 μl     Taq
酶 (2U/μl
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl
1 μl
ddH2O 50 μl

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

鸭病毒染料法荧光定量PCR试剂盒

50

BK-P64740

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
公司产品仅用于科研使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
鸭病毒染料法荧光定量PCR试剂盒5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

CL-0122HUVEC(HUV-EC-C) (人脐内皮细胞)5×106cells/瓶×2四环素盐酸盐,英文名或英文缩写:Tetracycline HC1,级别:BR96-100%,规格:100毫克

HGF Others Human 人 HGF / Hepatocyte Growth Factor CHO细胞裂解液 (阳性对照) 氘代本并[A] 98 ATOM % D BqNZO[c]PYRqNq-D12 63466-71-7

人食道平滑肌细胞裂解物HESMCL癌散,英文名或英文缩写:8-Azaguanine,级别:USP级,95%,规格:5毫克

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7) T细胞细胞,Jurkat,Clone E6-1细胞 MPC-83细胞,小鼠*腺泡细胞癌细胞γ,γ-联,英文名或英文缩写:4,4'-Bipyridine,级别:AR99%,规格:1

人肝永生化细胞;THLE-3MOPS 25g/100g/500g/1Kg原装 Amresco 0670
肾实质细胞Many types of cells包装:5 × 105(1ml)纤维素酶(酶活>45 U/mg)Cellulase质量规格:酶活>45 U/mgBC

3T6swiss细胞,小鼠胚胎成纤维细胞 癌细胞,M453细胞 谷胱甘肽过氧化物酶分析试剂盒GPXDL-脯氨酸DL-Proline质量规格:0.99

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-1DL-丙氨酸甲酯盐酸盐DL-Alanine methyl ester 质量规格:0.98

IL13RA2 Others Human  IL13RA2 / IL13R 细胞裂解液 (阳性对照) L-谷氨酸5乙酯H-Glu(OEt)-OH质量规格:0.985

牛肾细胞;MDBK(NBL-1)N-乙酰-DL-亮氨酸N-Acetyl-DL-leucine 质量规格:0.98
原代内皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml铜片Copper sheet质量规格:>99.5%,厚度0.1-0.2cm

HT1080细胞,纤维细胞 细胞,HCE1细胞 表皮色素细胞-中色素总RNAHEM-m NA氯化亚铜(>97%,BR)Copper(I) chloride质量规格:>97%,BR

非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+化亚铜(>99%,BR)Copper (I) iodide质量规格:>99%,BR

FGFR4 Others Human  FGFR4 / FGF Receptor 4 细胞裂解液 (阳性对照) 2'-脱氧鸟苷5'1酸二钠盐dGDP, 2'-Deoxyguanosine-5'-Diphosphate di salt质量规格:>97%,分子生物学级

小鼠肺腺癌低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);LA1-VAP33-GFPD-葡萄糖醛酸钠(> 98%BR)D-Glucuronic acid,  salt, monohydrate质量规格:> 98%BR
SPC-A-1细胞, 人细胞,HB细胞 tTA基因修饰的小鼠(B);P19-CAG-tTA-1D3二甲基亚砜(Standard for GC,99.95%(GC))Dimethyl sulfoxide质量规格:Standard for GC,99.95%(GC)

杂交瘤(B);IB3C10H12A12G2H8F3正癸醇(Standard for GC,99.5%(GC))n-Decyl alcohol质量规格:Standard for GC,99.5%(GC)

PVRL2 Others Mouse 小鼠 CD112 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 琥珀酸二乙酯(standard for GC,99.6%(GC))Diethyl succinate质量规格:standard for GC,99.6%(GC)

人脑微内皮细胞裂解物HBMECL癸二酸二乙酯(Standard for GC, 99.5% (GC))Diethyl sebacate质量规格:Standard for GC, 99.5% (GC)

CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 二十二烷(standard for GC,99.0%(GC))Docosane质量规格:standard for GC,99.0%(GC)