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大肠杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒(含致病性和非致病性)
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BK-P64707
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2021-01-22
  • 更新日期: 2024-04-16
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BK-P64707
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 %
规格 50次
是否进口

公司产品仅用于科研实验方法步骤:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

产品名称

规格

货号

大肠杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒(含致病性和非致病性)

50

BK-P64707

PCR实验步骤:
取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
两相分离 每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2mllvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,1530℃孵育23分钟。4℃12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%
③RNA
沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后1530℃孵育10分钟后,于4℃12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃7000rpm离心5分钟。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
公司产品仅用于科研使用方法:
一、样品采集:
1
、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2
、血液样品:用无菌注射器抽取受检者血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3
、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4
、病灶部位样品:取部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 6 10 倍稀释度为例)
1.
注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2.
标记 6 个离心管,分别为 765432
3.
用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4.
7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5.
换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6.
换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.
重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

实验注意事项:
1
RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料,不同的样本有不同要求,实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况;
2
)客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号;
3
)客户尽量不要提供DNARNA样品。
4
)样本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类,探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNARNA样品进行定量(包括*定量和相对定量)和定性分析。
主要服务:DNARNA*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术:引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR

CL-0023Ana-1(小鼠巨噬细胞)5×106cells/瓶×2聚蔗糖40010KU

TDGF1 Others Rat 大鼠 Cripto / TDGF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1紫杉醇 Docetaxel,99% 114977-28-5 25MG 通用试剂

小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基 100mLLB肉汤 LB Broth (Lqnnox)

MLTC-1小鼠间质细胞瘤细胞 MLTC-1 mouse Leydig cell tumor RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS硅烷偶联剂KH57010

IL22 Protein Human 重组人 IL22 / IL-22 / Ierleukin 22 蛋白11028-71-0刀豆球蛋白A(+4)CONCANAVALIN A TYPE III
癌细胞;MDA-MB-231头孢克1Cefixime质量规格:>98%,BR

KLK3 Others Human  KLK3 / PSA / Kallikrein-3 细胞裂解液 (阳性对照) NDSB 256(>98%,BR)NDSB 256质量规格:>98%,BR

MT-4 急性母细胞细胞NDSB-211NDSB-211质量规格:BR

A-673 横纹肌瘤细胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培养基+10%FBS中性红染色液Neutral red solution(1X)质量规格:Ind Grade

TDGF1 Protein Human 重组 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 标签)镍粉(>99.5%,SP)Nickel powder质量规格:>99.5%,SP
小鼠树突状细胞细胞;DCS腺苷-5'-1酸三锂盐ADP.Li3质量规格:>97%,BR

CD300LG Others Human  CLM-9 / EM4 / CD300LG 细胞裂解液 (阳性对照) 赤藓醇;赤藓糖醇Erythritol质量规格:>99%,BR

SK-N-BE(2)神经母细胞瘤细胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS5ˊ-1酸腺苷钡盐ADP.Ba质量规格:>98%,BR

TG-905细胞,脑胶质母细胞瘤细胞 荧光假单胞菌 滋养层绒毛细胞总RNAHVT NA1酸腺苷单钾盐ADP.K质量规格:>97%,BR

RM1(大鼠肌肉成纤维样细胞) 5×106cells/瓶×2肌苷-5'-1酸二钠盐IDP.Na2质量规格:>98%,BR
CM-H083人脐动脉内皮细胞完全培养基100mL胆碱非诺贝特Choline Fenofibrate质量规格:美国进口

Hepa 1-6, 小鼠细胞丙磺舒酰基β-D-葡萄糖苷酸Probenecid Acyl β-D-Glucuronide质量规格:美国进口

人癌细胞;MDA-MB-453 人角膜成纤维细胞完全培养基 100mL诺氟沙星-d5Norfloxacin-d5质量规格:美国进口

大肠杆菌通用染料法荧光定量PCR试剂盒(含致病性和非致病性)人口腔角质细胞cDNAHOK cDNA4-含氧诺氟沙星4-Oxo Norfloxacin质量规格:美国进口

CCL17 Others Mouse 小鼠 CCL17 / TARC 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-羟基诺氟沙星N-Hydroxy Norfloxacin质量规格:美国进口