人抗白蛋白抗体ELISA检测试剂盒检测方法
发表时间:2025-03-12
在样本处理完毕后,即可进入正式的ELISA检测步骤。首先,将处理好的样本和标准品分别加入预先包被有白蛋白的96孔板中,每个孔中加入的体积需严格按照说明书操作,以确保结果的准确性。随后,轻轻晃动孔板,使样本或标准品均匀覆盖孔底,然后置于37℃恒温箱中孵育一段时间,让抗体与白蛋白充分结合。
孵育结束后,取出孔板,弃去孔内液体,并用洗涤液反复洗涤数次,以去除未结合的抗体和杂质。洗涤完毕后,向每个孔中加入酶标二抗,同样置于37℃恒温箱中孵育。酶标二抗能够与已结合在白蛋白上的抗体特异性结合,为后续的显色反应做准备。
孵育结束后,再次洗涤孔板,然后加入显色底物。在酶的作用下,显色底物会发生颜色变化,且颜色深浅与样本中抗白蛋白抗体的含量成正比。因此,通过观察颜色变化并测定吸光度值,即可间接反映样本中抗白蛋白抗体的含量。
最后,使用酶标仪在特定波长下测定各孔的吸光度值,并根据标准品的吸光度值绘制标准曲线。通过对比样本的吸光度值与标准曲线,即可计算出样本中抗白蛋白抗体的具体浓度。
整个检测过程需严格控制实验条件,避免污染和误差,以确保检测结果的准确性和可靠性。