公司产品仅用于科研
中文名称： 人腺癌肺转移细胞直销
简称：T84

种属：人

来源：腺癌；肺转移；男性

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0147
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞人腺癌肺转移细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
9-Anthracenecarboxylic acid  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2    磺酸 SHES   25g

9-Aminominocycline   中文名：  分子式：C23H29ClN4O7    Isicacidsalt   100g              

9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene  中文名：9,9-双[4-(2-羟乙氧基)苯基]芴  分子式：C29H26O4    乙型   英文名称：   Influenza B HA   规格：   48T/96T   英文缩写：   HA

9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene  中文名：9,9-双(4-羟苯基)芴  分子式：C25H18O2    甲型H3N2HA1   英文名称：   Influenza A H3N2 HA1   规格：   48T/96T   英文缩写：   H3N2 HA1

9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  中文名：9,9-双(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式：C27H24N2    生长激素   英文名称：   growth hormone   规格：   48T/96T   英文缩写：   HGH
含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样  Pemetrexed di  中文名：培美曲塞二钠  分子式：C21H23N5Na2O6  度：98.0%

调节蛋白 (Thrombomodulin/sCD141)   作用：   ELISA   规格：   96T   法国 Diaclone  Rosuvastain Calcium  中文名：瑞舒伐他汀钙  分子式：C22H28FN3O6S 

素B2   英文名称：   Thromboxane B2   规格：   48T/96T   英文缩写：   TXB2  Pemetrexed  中文名：培美曲塞二钠  分子式：C20H21N5O6  度：98.0%

素B2   英文名称：   Human Thromboxanes B2   规格：   48T/96T   英文缩写：   TXB2  Pefloxacin mesylate  70458-95-6  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S  度：98.0%   

素B2   英文名称：   Human Thromboxane B2   规格：   48T/96T   英文缩写：   TXB2  Pefloxacin mesylate  中文名：甲磺酸培氟沙星  分子式：C18H24FN3O6S
Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  中文名：  分子式：C29H48O2  度：97.5%  兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dregeoside Da1  中文名：  分子式：C42H70O15  度：%  兔内皮素-1(rabbit ET-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Dehydroadynerigenin digitaloside  中文名：  分子式：C30H42O8  度：97.0%  兔纤维蛋白原降解产物(rabbit FDP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Cardenolide B-1  中文名：  分子式：C30H44O8  度：98.0%  兔促卵泡素(rabbit FSH)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Drevogenin A  中文名：  分子式：C28H42O7  度：%  兔碱性成纤维生长因子(rabbit b-FGF/FGF-2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
人腺癌肺转移细胞直销生存素 (survivin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Anthraflavic acid  中文名：二羟蒽醌  分子式：C14H8O4 

神经营养素3   英文名称：   Neuroophin-3   规格：   48T/96T   英文缩写：   -3  3-Hydroxychimaphilin  中文名：3-羟基梅笠草素  分子式：C12H10O3 

神经营养素 4(-4)   作用：   ELISA   规格：   96T   原装进口  3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt  219921-94-5  中文名：  分子式：C23H37N3O5  度：98.0%  关键词： 

神经营养素 4(-4)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2 

神经营养素 3(-3)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  3-Methoxyfuran  3420-57-3  中文名：  分子式：C5H6O2  度：99.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。