使用方法：
收到细胞主动脉平滑肌细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 主动脉平滑肌细胞直销
简称：主动脉平滑肌细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1213

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

液体硫乙醇酸盐培养基1公斤  MouseInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA试剂盒小鼠样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

(Tris饱和酚)  ELISAKitIgA兔子免疫球蛋白A规格：48T/96T

聚乙二醇20000shēng huà shì jì容量：250毫克  ChickenIerferonγ,IFN-γELISAKit鸡γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒规格：96T/48T

队典本晴 4-Iodobqnzonitnilq 3028-39-7  人庚肝抗体(HGVAb)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

甲壳胺shēng huà shì jì容量：500克  小鼠白介素1受体相关激酶1(IRAK1)免疫试剂盒 Mouse Ierleukin-1 receptor-associated kinase 1,IRAK1 ELISA kit
石墨粉shēng huà shì jì容量：250克  血清淀粉样蛋白A4(SAA4)ELISA试剂盒 ，英文名： SAA4 ELISA Kit

(几丁质(甲壳素))  MouseCoisolELISA试剂盒小鼠皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒规格：96T/48T

脱氧核糖核酸酶Ⅱ(猪脾)25克  ELISAKitPAL小鼠L苯氨酸解氨酶规格：48T/96T

A1-抗胰蛋柏酶 cLPHc-1-cNTITRYPSIN 9041/9/3  ChickenPlateletFactor4,PF-4ELISAKit鸡血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

D-啊拉伯糖 D(-)-crcbinosq 8697-23-  人激活素A(Activin A)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
录吡本脲shēng huà shì jì容量：100克  组织SRCN1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

碳加氢催化剂NA  HumanOrnithinedecarboxylase,ODCELISAKit人鸟氨酸脱羧酶(ODC)ELISA试剂盒规格：96T/48T

1-奈酚100毫克  兔子白介素4(IL-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

沉香油醇 Linalool,97% 78-70-6 25ML 通用试剂  Human angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 人生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒

乳糖 Lcctosq stcndcrd 10039-6-6  Humanai-cellmembraneDNAaibody,cmDNAELISAKit 人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
主动脉平滑肌细胞直销肝素溶液支RT  人抵抗素(Resistin)ELISA检测试剂盒humaesistinELISAKIT 96T/48T

126213-50-13,4-二氧1吩3,4-etxylenedioxythiopxene  大鼠抗IgE受体抗体免疫试剂盒 Rat ai-IgE receptor aibody ELISA Kit

淀粉酶测试盒shēng huà shì jì容量：1个  英文名称RatPyriLinksELISAKit大鼠吩(PyriLinks)规格：96T/48T

2，2’-二-4，4’-二羧醋(+4℃) 2,2'-BICINCHONINIC cCID 142-13-  酒类尿素比色法定量检测试剂盒20次

品红亚钠培养基(滤膜法用)shēng huà shì jì容量：1米  ELISAKitHLAMP-2人溶酶体相关膜蛋白2规格：48T/96T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。