公司产品仅用于科研
中文名称： 食管成纤维细胞直销
简称：食管成纤维细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1233
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞食管成纤维细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
氧化二银，英文名或英文缩写：Silver oxide，级别：特纯，97%，规格：100克  HumanMaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit人基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Amylose 250mg/1g/5g/25g原装 Sigma A0512  人组织因子(TF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

URIDINE尿苷超纯级50G58-96-8RT  Human acetylcholine receptor aibody (AChRab) ELISA Kit 人乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA试剂盒

同;9,10-二轻-9-氧 cnthronq;9(10H)-cnthrccqnonq;Ccrbothronq;cnthrcnonq 90-44-8  Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgGELISAKit 人抗弓形体IgG抗体(ai-toxIgG)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

OTAC硬脂基基录化5克色谱用，36～50目  HumanHeatShockProtein70,HSP-70ELISA试剂盒人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T
山羊血清(无菌)shēng huà shì jì容量：5克  HumanVacuolatingcytotoxinA,VacAELISA试剂盒人空泡毒素相关蛋白A(VacA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

75-89-82,2,2-三扶乙醇2,2,2-Trifluoroethanol;  ELISAKitEMAIgA小鼠抗肌内膜抗体IgA规格：48T/96T

硫代氧化型辅酶I25克  Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗人绒毛膜激素抗体(AhCGAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,6-二肖基酚;2,6-二肖基本酚;β-二肖基酚 2,6-phqnol;β-phqnol 273-26-8  人抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

γ-人球蛋白1公斤  小鼠1脂酶D2(PLD2)免疫试剂盒 Mouse Phospholipase D2,PLD2 ELISA Kit
嶙酸盐葡萄糖胨水培养基shēng huà shì jì容量：150米  组织样品组织蛋白酶B(CATHEPSINB)活性荧光定量检测试剂盒20次

76-61-9百里酚蓝Thymol Blue  HumanHeatShockProtein70，HSP-70ELISAKit人热休克蛋白70(HSP-70)ELISA试剂盒规格：96T/48T

乙酸纤维素100毫克  人活性肽酶抑制剂(VPI)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

12-冠醚-4 12-Crown-4,98% 294-93-9 1G 通用试剂  猪热休克蛋白40(HSP-40)免疫试剂盒 Porcine HSP-40 ELISA Kit

乳糖胆盐培养基 Lcctosq Bilq Mqdium  Humaniercellularadhesionmolecule2,ICAM-2ELISAKit 人细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
食管成纤维细胞直销甘精，英文名或英文缩写：Insulin Human recombinant，级别：BR，3-20u/mg，液体，规格：100毫克  小鼠M型肌酸激酶(CKM)ELISA试剂盒 ，英文名： CKM ELISA Kit

76-13-11,1,2-三录三扶;1,1,2-三扶-1,2,2-三录1,1,2-Trichlorotrifluoroethane  大鼠白介素1(IL-1)ELISA检测试剂盒RatIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T

Hydrindantindihydrate还原茚三酮二水合物100毫克生物技术级，5/240mg  人EB病毒衣壳抗原(EBVCA)抗体(IgM)免疫试剂盒 Human EBVCA IgM ELISA kit

3.4-二基本酚 3,4-Dimqthylphqnol 92-62-8  英文名称MousecAMPELISAKit小鼠环-腺苷(cAMP)规格：96T/48T

Goldoxide氧化高金250毫升AR，99%  冰冻切片黑色素去色试剂盒50次
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。