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IL-11 小鼠白介素11ELISA检测试剂盒操作步骤

2023-01-30

IL-11 小鼠白介素11ELISA检测试剂盒操作步骤:

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

ADRB2 肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体
AGEs 晚期糖基化终末产物抗体
Aggrecan1 软骨蛋白聚糖抗体
ALAS-E 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
ASPP1 p53凋亡刺激蛋白1抗体
ASPP2 P53凋亡刺激蛋白2抗体
ARIP2B 激活素受体2B抗体
AIMP2 AIMP2抗体
ACHE 乙酰胆碱酶抗体
ALAS1 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
alpha Defensin 1 防御素α1/3抗体
ABCG4 ABC膜转运蛋白抗体
ATEXPA10 植物延长蛋白(拟南芥)
A Raf A-Raf抗体
Phospho-A Raf(Ser299) 磷酸化A-Raf抗体
AMPD3 红细胞腺苷脱氨酶3抗体
ABP 雄激素结合蛋白抗体
ALR 肝再生增强因子抗体
Amyloid Precursor Protein APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体
AFP(A2) 甲胎蛋白单克隆抗体(包被)
AFP(A4) 甲胎蛋白单克隆抗体(检测)