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FAS试剂盒异常时,最常见3个排查

发表时间:2025-12-24
FAS试剂盒异常时,最常见3个排查点如下:
试剂相关问题:检查试剂是否过期、变质或保存不当。特别是冻干标记物,需确保按照瓶上标签用蒸馏水准确溶解,并在2-8℃最多存放两周。
操作步骤问题:确认实验操作步骤是否正确,包括试剂加入顺序、温育时间等。例如,稀释标记物时应先在塑料瓶中加入较多体积的实验缓冲液,再加入标记物,并确保完全混合。
设备与环境问题:检查实验设备(如酶标仪、移液器等)是否正常工作,以及实验环境是否符合要求(如温度、湿度等)。确保实验缓冲液标签正确,标记物使用前1小时内用对应试剂盒内的实验缓冲液按比例稀释,并且稀释标记物必须使用一次性塑料瓶。
反应温度与仪器参数(确保“检测条件正确”)
温度每偏离37℃±1℃,FAS活性波动10%;仪器波长错设(如450nm而非340nm)会直接导致“测不到信号”,这是最容易被忽略的“低级错误”。
温度校准:用温度计实测水浴锅/金属浴温度(而非依赖设备显示),确保37℃±0.5℃;反应管需完全浸入水中(避免漂浮导致局部温度低)。
仪器设置:
波长必须为340nm(NADPH的特征吸收峰);
比色皿光径是否为1cm(若用0.5cm,需在计算公式中修正d=0.5);
分光光度计是否预热30分钟(开机直接测会导致读数漂移)。
以上排查点有助于快速定位并解决FAS试剂盒异常问题。
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