一、实验前准备（试剂准备区）
试剂解冻与混匀
将试剂盒各组分从-20℃冰箱取出，在冰上缓慢融化后，短暂离心使液体沉于管底，充分混匀。
分区操作要求
实验应在独立的三个区域进行：
试剂准备区（配制PCR反应液）
样本处理区（提取DNA）
PCR扩增区（上机检测）
各区实验服、移液器、吸头应专用，避免交叉污染。
使用带滤芯吸头?，防止气溶胶污染。
二、样本处理（样本处理区）
样本类型
可使用皮肤刮屑、指甲碎片、毛发或培养菌落等。建议先进行增菌培养以提高检出率。
DNA提取
使用市售DNA提取试剂盒或试剂盒配套的裂解液进行核酸提取。
若使用快速裂解法：将约100 mg样本加入0.1 mL溶液A，95℃保温10–15分钟，再加0.1 mL溶液B混匀，取上清作为模板。
提取后DNA应立即使用或-20℃保存。
设置对照
样品制备阳性对照：在适量水中加入10 μL阳性对照的1000倍稀释液。
样品制备阴性对照：仅用水作为空白。
每批实验至少设置一个N+2样本（N为待测样本数）。
反应管标记与加样顺序：
标记N+4个PCR管（N个样品 + 1个PCR阴性对照 + 1个PCR阳性对照 + 2个标准品管，如需定量）
先加入PCR Mix和引物，再依次加入模板
最后加入阳性对照?，防止污染
