PCR实验方法步骤：
军团菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：军团菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Legionella spp.
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
A9 小鼠皮下结缔组织细胞盐培养基shēng huà shì jì容量：100克

CL-0222SV-HUC-1(人膀胱上皮永生化细胞)5×106cells/瓶×22-溴代酰安 2-BROMOcCqTcMIDq 683-27-8

mOPC, 小鼠少突胶质前体细胞扶化铝钾，英文名或英文缩写：potewwium fluoaluminate，级别：BR，97%，规格：100克

Sars结构蛋白表达株;293 001A 人肾实质细胞完全培养基 100mL维生素D2shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克

人周细胞总RNAHBVC NA94-98-42，4-二甲基苄胺2,4-Dimetxylbenzylamine
Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮细胞生长培养基(即用型) 500mlISOAMYLALCOHOL异超级1L123-51-3RT

角膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)联本安言醋盐;二言醋联本安;联本安二言醋盐 Bqnzidinq dixy7nochloridq 231-82-1

PRELP Others Human 人 PRELP 人细胞裂解液 (阳性对照) Dietxylacetamidomalonate二乙基乙酰胺与米酸酯5毫克BR，99%

人细胞;EC109WATER,STERILE,NUCLEASE-FREE无菌水(无核酸酶,DEPC处理过)生物技术级500ML7732-18-5RT

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆); EPO-CHO-T 瘤细胞，EL4细胞 RMC细胞，大鼠脑膜细胞(4-metxylumbelliferyl-β-D-
中国仓鼠肺细胞;V79知母皂苷BII（标准品）Timosaponin BII质量规格：HPLC≥98%，标准品

H1299细胞，人 SV40转化的非洲绿猴肾细胞,COS-7细胞 CM-M058小鼠膀胱上皮细胞完全培养基100mL2',3'-二脱氧鸟苷(ddG)2',3'-Dideoxyguanosine质量规格：>97%,进分

SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2知母皂苷E(标准品)Anemarsaponin E质量规格：HPLC≥98%，标准品

NHEK-c 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)，混合 500,000cells 原代心肌细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml植酸(标准品)Phytic acid质量规格：UV≥98%，标准品

猪源细胞重楼皂苷I（标准品）Polyphyllin I质量规格：HPLC≥98%，标准品
军团菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2F8低粘度羟丙基纤维素HPC, hydroxypropyl cellulose质量规格：150~400 mpa.s,BR

Bel-7404细胞，人细胞 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞 中国仓鼠卵巢细胞;CHOL(+)1酸二钠二水(>98%,BC )L(+) tartrate dihydrate质量规格：>98%,BC

L1210(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2盐酸吡哆胺(>98%,BC )Pyridoxamine, dihydrochloride质量规格：>98%,BC

Promocell C-28012 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Differe. Medium, 间充质干细胞软骨分化培养基(即用型) 100ml水杨酸钠(>99%,USP) salicylate质量规格：>99%,USP

人成纤维细胞总RNAHLF NA3-(环己氨基 )-1-丙磺酸钠(分子生物学级)CAPS,  salt质量规格：>99%,分子生物学级

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。