PCR实验方法步骤：
中间葡萄球菌探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
产品仅供科研使用3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

产品参数：
产品名称：中间葡萄球菌探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：Staphylococcus intermedius
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
D407细胞，人视网膜色素上皮细胞 出芽短梗霉 人急性T细胞性细胞;I 2.1(CRL-2572)(R)-N-去乙基奥昔布宁盐酸盐质量规格：美国进口(R)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride

ANGPT4 Protein Human 重组人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (Fc 标签)α-去环己基-α-苯基奥昔布宁质量规格：美国进口α-Descyclohexyl-α-phenyl Oxybutynin

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纤维 5×106cells/瓶×2 小鼠 AMICA1 / JAML 人细胞裂解液 (阳性对照) (S)-N-去乙基盐酸奥昔布宁质量规格：美国进口(S)-N-Desethyl Oxybutynin Hydrochloride

水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)(S)-盐酸奥昔布宁质量规格：美国进口(S)-Oxybutynin hydrochloride

ERBB4 Others Rat 大鼠 HER4 / ErbB4 人细胞裂解液 (阳性对照) 奥司他韦酸质量规格：美国进口Oseltamivir Acid
前脂肪细胞培养基PAM-prf10-羟基喜树碱(标准品)质量规格：HPLC>98%,S构型，标准品(s)-10-hydroxycamptothecin

Hela细胞，人Hela细胞耐药亚株(Hela/DDP) 小鼠骨髓细胞,FDC-P1细胞 原代神经元细胞培养特制添加剂Many types of cells包装：5/2.5/1ml甘草素（消旋）质量规格：HPLC≥98%，标准品Liquiritigenin

HB611(人细胞) 5×106cells/瓶×2鸟嘌呤硫酸盐质量规格：>98.0%，进口原装Guanine Sulfate

hMSC-UC Pellet 人类脐带基质中的间质干细胞团块 > 1 mio.cells 人总RNAHPF NA腺嘌呤盐酸盐质量规格：>98%,BRAdenine hydrochloride

CM-M097小鼠皮下脂肪细胞完全培养基100mL肌苷；核苷质量规格：>98.5%,BRInosine
CDH1 Others Rat 大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基纤维素10克

Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)2,4-二录录苄 2,4-Dichlorobqnzyl chloridq 94-99-2

CCRF-CEM细胞，人急性细胞T细胞 小鼠细胞,C3细胞 人肝窦内皮细胞cDNAHHSEC cDNA尼龙膜N+5克2～8℃

PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2菌种培养基shēng huà shì jì容量：100毫升

CT26.WT(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0198RM-1(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2 人APP基因转染CHO细胞株;7WD10-录本酚2-Chloropxenol
中间葡萄球菌探针法荧光定量PCR试剂盒mCF, 小鼠成纤维细胞 MouseN-苄氧羰基-L-苏氨酸Z-Thr-OH质量规格：0.98

FOLR1 Others Mouse 小鼠 FOLR1 / FR-alpha 人细胞裂解液 (阳性对照) N-苄基甘氨酸盐酸盐N-Benzylglycine hydrochloride质量规格：美国进口

人癌细胞;MDA-MB-453N-苄基甘氨酸乙酯N-Benzylglycine ethyl ester质量规格：美国进口

人内皮细胞 (HLEC)( 5×105 )氨基扎那米韦Zanamivir Amine质量规格：美国进口

CL-0431RT4(人膀胱移行细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2维达列汀羧酸代谢产物Vildagliptin Carboxylic Acid Metabolite质量规格：美国进口

操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。