产品参数：
产品仅供科研使用产品名称：动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒
英文名称：
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年

PCR实验方法步骤：
动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

注意事项：
1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；
2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；
3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。
4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。
主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。
主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
操作流程：
产品仅供科研使用1. 整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器 、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2. 为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3. 每次实验应该设置阴、阳性对照。
4. 试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5. 试剂盒内所配阴性和阳性对照在一次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6. 为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7. 仪器 扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8. ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9. 实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
VSIG8 Others Human 人 VSIG8 人细胞裂解液 (阳性对照) 人参皂甙Rb3，英文名或英文缩写：Ginsenoside Rb3，级别：BR，规格：25克

人胚肺二倍体细胞;HEL-26-溴-1-己1 6-Bromo-1-hqxqnq 692-47-8

大鼠细胞;IR983F 腺癌细胞，Caco-2细胞 WEHI 164细胞，鼠纤维细胞系乙二茶碱，英文名或英文缩写：Aminophylline hydrate，级别：AR，规格：25克

GBC-SD, 人细胞 Human氢氧化shēng huà shì jì容量：25克

CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人细胞裂解液 (阳性对照) (2-羟基磺酸))
rCF, 大鼠成纤维细胞 A4细胞 HL-7702(肝细胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate质量规格：≥98.0%

人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶银Silver Sulfadiazine质量规格：>98%,USP31,BR

EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺嘧啶银(标准品)Silver Sulfadiazine质量规格：>98%,标准品

人结细胞;T84辛伐他汀 Simvastatin质量规格：>99%,BR,细胞培养级

CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀,辛伐他丁（标准品）Simvastatin质量规格：HPLC>98%,标准品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) Gold(III)chloride三录化金1克特，97%

人胚;HFL1言醋布比卡应 Bupivcccinq xy7nochloridq 73360-24-0

狗肾细胞;Super Tube 胚胎成纤维细胞，3T6-Swiss albino细胞 Hed68细胞，果子狸肾上皮细胞橄榄油 Olive oil (highly refined, low acidity) 8001-25-0 100ML 通用试剂

人胚;WI-38 [WI38]EriochromeblueblackR依来蓝R500克100s/盒

HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) L-Histidine 5g/10g Sigma分装
动物源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Caki-1, 人肾透明细胞癌细胞 Human(-)-Blebbistatin(-)-Blebbistatin质量规格：>98%

CEACAM1 Others Mouse 小鼠 CEACAM1 / CD66a 人细胞裂解液 (阳性对照) 奈达铂;顺糖氨铂Nedaplatin质量规格：>98%,BR

角质细胞培养基KM5-甲基-1,10-菲咯啉水合物(>98.0%(T))5-Methyl-1,10-phenanthroline Hydrate 质量规格：>98.0%(T)

FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,10-邻二氮杂菲-5,6-二酮(>98.0%(HPLC)(T))1,10-Phenanthroline-5,6-dione质量规格：>98.0%(HPLC)(T)

人类成纤维细胞系;CNLMG-B5537SKINTPP(=四苯基卟啉)TPP (=Tetraphenylporphyrin) 质量规格：铜用超高灵敏分光光度试剂