上海帛科生物技术有限公司
   
     
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THC-8307细胞
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:E01192
  • 价格: ¥1550/株
  • 发布日期: 2020-10-08
  • 更新日期: 2025-07-11
产品详请
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 E01192
用途 公司产品仅用于科研
组织来源 高分化结肠癌
细胞形态 详见说明书
是否是肿瘤细胞
CAS编号
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
生长状态 贴壁
物种来源
包装规格
纯度 详见说明书%
是否进口

帛科细胞培养器材的选择:从培养量大小来讲,从小到大有细胞培养板、细胞反应管、摇瓶、细胞培养瓶、细胞工厂等,更大就是反应器了。

产品名称

规格

货号

THC-8307细胞

E01192

产品简称:THC-8307细胞
中文名称:人高分化腺癌细胞

规格:瓶

种属:人

来源:高分化

培养基:DMEM

状态:贴壁

单位:

货号:E01192

帛科细胞培养瓶培养面积从25-225平方厘米不等,一般都经过表面改性处理,适合细胞贴壁和生长。225ml 175ml的多用于大规模培养时用(如单克隆细胞的培养等),75ml的多用于一般性细胞实验用(一般性的传代,保存细胞,为实验提供细胞等),25ml一般是用来复苏细胞或细胞较少时的培养,还有做原代细胞时也可以做多瓶而避免交叉污染。产品仅用于科研
细胞培养的具体步骤和注意事项:
1.细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后,在37水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37oC预热的DMEM完全培养基中(其中胎牛血清约为10%),轻轻吹匀,离心,500g离心2min,弃上清液。
加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。
2.
细胞传代
帛科细胞密度达到80%~90%(过量不足,过晚细胞状态不佳,1:21:10以上的比率传代培养,一般1:31:5细胞一代,即从细胞接种到分离再培养的一段时间,非细胞有丝分裂次数)时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以盖住细胞**消化温度是37oC。显微镜下观察细胞:倒置显微镜下观察消化细胞,若胞质回缩,细胞之间不再连接成片,表明此时细胞消化适度)进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min 
加入适量DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。
加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,吸取10微升进行计数,然后按照所需细胞量在含5% CO2的细胞培养箱继续培养。

3.细胞冻存
当细胞密度达到80%~90%时,去掉完全培养基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶进行消化,放入细胞培养箱中约2-3min。加入DMEM完全培养基终止胰蛋白酶消化,转移至离心管后500g离心2min,弃上清液,再加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入lml冻存液(90%胎牛血清,10% DMSO 
一般来讲血清含量可以在10%-90%之间调整,冻存液中加入血清一方面可以为细胞提供营养,另一方面可以在细胞冻存过程中提供非渗透性保护物质,如蔗糖,白蛋白等从而更好地保护细胞),放入冻存管内(管内有异丙醇,以保证温度降低的速度),立即放入4oC冰箱中冻存30min,然后放入-20oC冰箱中冻存30min,再置于-80冰箱内过夜。
*
天放入液氮中,可以保存至少两年,如不放人液氮,可以保存三个月。 
细胞冻存和复苏的原则是:慢冻速融,这样更加有利于保持细胞的活力。冻存细胞不加任何保护剂,会导致细胞内冰晶的产生,从而使细胞产生内源性的机械损伤,引起细胞内环境渗透压,PH,电解质等的改变,进而促使细胞死亡。

注意事项:
THC-8307细胞1)预热培养用液:把已经配制好的装有培养液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37水浴锅内预热;
2)用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手;
3)正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且减少污染;
4)点燃酒精灯:注意火焰不能太小;
5)严格的无菌操作;
6)贴壁细胞消化适度:消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响,消化过程中应该注意培养细胞形态的变化,一旦胞质回缩,连接变松散,或有成片浮起的迹象就要立即终止消化;
7)传代细胞所有的操作尽量靠近酒精灯火焰。每次*只进行一种细胞的操作,每种细胞使用一套器材。避免交叉感染;
8)传代细胞瓶口每次打开或者关闭都需要在酒精灯上消毒。

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