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碱性蛋白酶测试盒可见分光光度法
  • 品牌:帛科
  • 产地:国产
  • 型号:50管/24样
  • 货号:BK-S01628
  • 发布日期: 2020-10-16
  • 更新日期: 2024-04-18
产品详请
产地 国产
品牌 帛科
货号 BK-S01628
用途范围 公司产品仅用于科研
纯度 详见说明书%
别名 碱性蛋白酶测试盒
规格 50管/24样
是否进口

基本信息:

产品名称

检测方法

规格

货号

碱性蛋白酶测试盒可见分光光度法

可见分光光度法

50/24

BK-S01628

商品介绍:

测定意义
AKP是指在碱性条件下催化蛋白质肽键水解的酶类,属于丝氨酸蛋白酶。此外,该酶还能够水解酯键、酰胺键,具有转酯及转肽的功能。该酶是主要工业用酶之一,广泛应用于制药、丝绸、食品、制革等行业。

测定原理:

在碱性条件下,AKP水解酪蛋白生成酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸生成钨蓝;钨蓝在680nm有特征吸收峰,测定680nm吸光度增加速率,来计算AKP活性。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、0.5 mL EP管和蒸馏水。

特点:
(1)应用广泛 产品仅用于科研
由于各种各样的无机物和有机物在紫外可见区都有吸收,因此均可借此法加以测定。到目前为止,几乎化学元素周期表上的所有元素(除少数放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)灵敏度高
由于相应学科的发展,使新的有机显色剂的合成和研究取得可喜的进展,从而对元素测定的灵敏度大大提高了一步。特别是由于多元络合物和各种表面活性剂的应用研究,使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到几十万。相对于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和准确度一致公认是比较高的。不但在实际工作中光度法被广泛采用,在标准参考物质的研制中,它更受重视,很多光度分析法已制定成为标准方法。
(3)选择性好
目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定,如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定,已有比较满意的方法了。
(4)准确度高
对于一般的分光光度法来说,其浓度测量的相对误差在1-3%范围内,如采用示差分光度法测量,则误差往往可减少到千分之几。
(5)适用浓度范围广
可从常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(经预富集后)。
(6)分析成本低、操作简便、快速

实验方法学:
一、肝素的配制:
市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以 更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
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兔子氧化(OxLDL)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Adefovir dipivoxil  中文名:阿德福韦酯  分子式:C20H32N5O8P  度:98.0%

兔子氧化(OxLDL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Adefovir  106941-25-7  中文名:阿德福韦  分子式:C8H12N5O4P  度:98.0%  关键词: 

兔子氧化(OxLDL)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  1-Methyl-aminomethyl naphthalene  14489-75-9  中文名:  分子式:C12H13N  度:98.0%  关键词: 

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小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Conduritol A  中文名:牛弥菜醇A  分子式:C6H10O4  度:97.0%

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小鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Conduritol A  中文名:牛弥菜醇A  分子式:C6H10O4 

小鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Colelomycerone A  1191896-73-7  中文名:  分子式:C17H18O6  度:98.0%  关键词:  ; ; 萘醌; 对照品; 标准品; 微生物代谢产物; 天然产物; 天然产物库
Deflazacort  中文名:地夫可特  分子式:C25H31NO6    猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Deferasirox  中文名:地拉罗司  分子式:C21H15N3O4    猪病毒IgG(HEV-IgG)ELISA试剂盒   48T/96T   试剂盒   组装/原装        

Decoquinate  中文名:癸氧喹酯  分子式:C24H35NO5    猪纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Decanedioic acid  中文名:  分子式:C10H18O4    猪纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Daucosterol  中文名:胡萝卜苷  分子式:C35H60O6    猪血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
碱性蛋白酶测试盒可见分光光度法Guaiacol glycidyl ether  中文名:  分子式:C10H12O3  度:98.0%  小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid  中文名:  分子式:C12H14O3S  度:98.0%  小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CⅠCP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Cinnamyl 3-aminobut-2-enoate  中文名:  分子式:C13H15NO2  度:98.0%  小鼠Ⅰ型胶原N末端肽(X)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

2-Deoxy-2,2-difluoro-D-erythro-pentafuranous-1-ulose-3,5-dibenzoate  中文名:  分子式:C19H14F2O6  度:98.0%  小鼠17羟皮质类固醇(17-OHCS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

D-Mannitol diacetonide  中文名:  分子式:C12H22O6  度:98.0%  小鼠白介素1α(IL-1α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。