产品分类

U251 MG/TMZ
物品单位 价格 品牌
1880 帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:CE035
  • 发布日期: 2020-10-19
  • 更新日期: 2020-10-19
产品详细说明
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 CE035
组织来源
细胞形态 详见说明书
是否是肿瘤细胞
CAS编号
规格 1×10E6T25/管
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
用途范围 公司产品仅用于科研
生长状态 贴壁
物种来源 Human
纯度 详见说明书%
是否进口

产品简称:U251 MG/TMZ
产品名称:人类星形耐替莫唑胺细胞

规格:1×10E6T25/

种属:Human

货号:CE035

产品名称

U251   MG/TMZ

单位

货号

CE035

帛科细胞工厂适用于工业批量生产,如疫苗,单克隆抗体或者制药工业,也适用于实验室操作和大规模细胞培养。方便实用,有效避免污染。

细胞的冻存:
1.先将冻存管放入4冰箱,约40min
2.
接着置于-20冰箱,约30-60min
3.
置于-80超低温冰箱中放置过夜。
4.
置于液氮罐中长期保存。
5
产品仅用于科研同时做好冻存记录,在自己的笔记本和冻存记录本上均要记录。
注意事项:
1.使用DMSO前,不需要进行高压灭菌,它本身就有灭菌的作用。高压灭菌反而会破华它的分子结构,以至于降低冷冻保护效果。在常温下,DMSO对人体有害,故在配制时*戴上手套操作。
2.
不宜将冻存细胞放置在0-60这一温度范围内过久,低温损伤主要发生在这一温度区内,是危险温区
3.
注意定期检查液氮罐内液氮量,及时添加。

具体步骤:
U251 MG/TMZ. 水的制备:
帛科细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水
.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:HanksD-Hanks液的配制)
1.
溶解定容:将药品(NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4·H2O 1.56gKH2PO40. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml,摇匀即成新配制的PBS溶液。
2.
移入溶液瓶内待消毒:将PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。
. 胰蛋白酶溶液的配制与消毒:
胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH8.0、温度为37时,胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+Mg2+BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。
1.
称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为0.25%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH7.2左右)或PBSD-hanks)液中。搅拌混匀,置于4内过夜。
2.
用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。然后分装成小瓶于-20保存以备使用。

细胞计数:
1.盖好盖玻片:取一套血球计数板,将特制的盖玻片盖在血球计数槽上。
2.
制备计数用的细胞悬液:用吸管吸5滴细胞悬液到一离心管中,加入5滴台盼蓝染液(0.4%)或苯胺黑,活细胞不会被染色,加入染液后就可以在显微镜下区别活细胞和死细胞。
3.
将细胞悬液滴入计数板:将待测细胞悬液吹均匀,然后吸取少量悬液沿盖片边缘缓缓滴入,要保证盖片下充满悬液,注意盖片下不要有气泡,也不能让悬液流入旁边槽中。
4.
统计四个大格的细胞数:将血球计数板放于显微镜的低倍镜下观察,并移动计数板,当看到镜中出现计数方格后,数出四角的四个大铬(每个大格含有16个中铬)中没有被染液染上色的细胞数目。
5.
计算原细胞悬液的细胞数:按照下面公式计算细胞密度:
(细胞悬液的细胞数)/ml 四个大格子细胞数/4) ×2×104
说明:公式中除以4因为计数了4个大格的细胞数。
公式中乘以2因为细胞悬液于染液是11稀释。
公式中乘以104因为计数板中每一个大格的体积为:
1.0mm
(长)×1.0mm(宽)×0.1mm(高)=0.1mm3 1ml1000mm3

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U251 MG/TMZ
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