公司产品仅用于科研

中文名称： 大鼠肝星形细胞

简称：HSC-T6

种属：大鼠

来源：肝；SV40转化；Spragu BKDawley

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0271

基本特性：

（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。

（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。

（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。

（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。

（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。

（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：

收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；

3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；

4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：

1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。

2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。

3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。

4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。

5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。

6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。

7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。

8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。

9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。

10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

phospho-ATF2 (Ser94) 英文名称： 磷酸化活化复制因子2抗体 0.1ml

phospho-ATXN1(Thr236) 英文名称： 磷酸化失调症蛋白1抗体 0.1ml

ANKRD17 英文名称： 锚蛋白重复结构域蛋白17抗体 0.2ml

ALDH1A1 英文名称： 胞质乙醛脱氢酶1抗体 0.2ml

ARL3 英文名称： ADP核糖基化样因子ARL3抗体 0.2ml

15 Lipoxygenase 1 英文名称： 花生四烯酸15脂氧合酶1抗体 0.2ml

ABC2 英文名称： 增强蛋白2抗体 0.2ml

Alpha 1 microglobulin 英文名称： α1微球蛋白抗体 0.2ml

Alpha B Crystallin 英文名称： α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体 0.1ml

ADORA2B 英文名称： 腺苷A2b受体/神经生长因子1受体抗体 0.1ml

ARK5 英文名称： AMPK的相关蛋白激酶5抗体 0.2ml

ANP32C 英文名称： 致瘤磷蛋白32相关蛋白1抗体 0.2ml

Adenosine deaminase 英文名称： 腺苷脱氨酶抗体 0.1ml

ASB4 英文名称： 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族4抗体 0.2ml

ATRNL1 英文名称： ATRNL1蛋白抗体 0.2ml

AFP4a 英文名称： AFP4a蛋白抗体 0.2ml

APBB2 英文名称： 铁蛋白Fe65样蛋白1抗体 0.2ml

APBB3 英文名称： 铁蛋白Fe65样蛋白2抗体 0.2ml

APPBP2 英文名称： β淀粉样蛋白前体蛋白结合蛋白2抗体 0.2ml

Aph-1b 英文名称： 早老素稳定因子样蛋白/γ分泌酶组件蛋白APH1抗体 0.2ml牛津琼脂基础 100g 用于单核增生李斯特氏菌的选择性分离(SN0184-2005)。

半固体琼脂 250g 供细菌动力观察、菌种保存等用(GB 4789.4－2010和GB/T4789.8－2008)。

李氏增菌肉汤基础(LB1，LB2) 250g 用于李斯特氏菌的选择性增菌培养(GB 4789.30-2010)。

改良的Mc Bride琼脂MMA 250g 用于单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养(GB/T4789.30-2003，SN0184-93)。

胰酪胨大豆酵母浸膏琼脂 250g 广泛用于细菌的培养，特别用于食品中李斯特氏菌的分离培养(GB/T4789.30-2010和SN/T 0184-2005，I...

胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤TSB-YE 250g 广泛用于细菌的培养，特别用于食品中李斯特氏菌的增菌培养(GB/T4789.30-2010和SN0184-2005，ISO标...

硝酸盐蛋白胨水培养基(硝酸盐胨水培养基) 250g 用于鉴别绿脓杆菌分解硝酸盐产气试验(GB15979-2002,《中华人民共和国药典》2005年版，化妆品卫生...

假单胞菌琼脂基础培养基/CN琼脂 250g 用于饮用天然矿泉水检验中铜绿假单胞菌的测定。（GB/T 8538-2008）

金氏B培养基 250g 用于饮用天然矿泉水中铜绿假单胞菌产荧光特性的测定。（GB/T 8538-2008）

绿脓菌素测定用培养基PDP（药典） 250g 用于鉴别绿脓杆菌产生绿脓菌素试验。(《中华人民共和国药典》2010年版)

绿脓菌素测定用培养基（PDP） 250g 用于鉴别绿脓杆菌产生绿脓菌素试验(GB15979-2002，(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。

溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基 250g 用于绿脓杆菌及其它革兰氏阴性非发酵菌的选择性分离培养。(《中华人民共和国药典》2010年版)

十六烷三甲基溴化铵培养基 100g 用于绿脓杆菌及其它革兰氏阴性非发酵菌的选择性分离培养(GB15979-2002，化妆品卫生规范微生物检验...

乙酰胺培养基 100g 用于革兰氏阴性非发酵菌特别是绿脓杆菌的选择性分离培养(化妆品卫生规范微生物检验方法2007版)。

明胶培养基(营养明胶) 100g 供测定细菌液化明胶使用(GB15979-2002和GB/T4789.28－2003 中3.10，GB/T4789.35－2003)。

明胶培养基(营养明胶) 100g 供测定细菌液化明胶使用(GB15979-2002和GB/T4789.28－2003 中3.10，GB/T4789.35－2003)。

L-酪氨酸营养琼脂配套试剂 10支/盒 L-酪氨酸营养琼脂基础配套试剂

L-酪氨酸营养琼脂基础 250g 用于蜡样芽孢杆菌的L-酪氨酸分解试验。

Additives Tyrosine Agar 10支/盒

Tyrosine Agar Base 500g 用于蜡样芽孢杆菌的L-酪氨酸分解试验。Tyrosine agar is used for tyrosine decompose test by B...

大鼠肝星形细胞甘露醇卵黄多粘菌素琼脂平板（MYP） 90mmX20个 用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...

血平板 90mm×20个 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验(GB 4789.10－2010，GB/T4789.37－2008 ，GB 4789.30－2...

甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础MYP 250g 用于蜡样芽孢杆菌的菌数测定及分离培养(GB/T4789.28-2003中4.64，GB/T4789.14-2003，SN0176-92和...

胰蛋白胨大豆肉汤培养基 250g 可广泛应用于细菌的培养，特别用于消毒剂消毒效果的测试、金黄色葡萄球菌的非选择性增菌培养及蜡...

操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。