使用方法：
收到细胞大鼠成纤维细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 大鼠成纤维细胞现货供应
简称：RAT2

种属：大鼠

来源：成纤维细胞；自发永生；Fischer 344

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE01063

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

(+)-Noe's reagent  中文名：(+)-核欧沃豪斯效应试剂  分子式：C24H38O3  度：98.0%  小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

1,2-Bis(3-indenyl)ethane  中文名：1,2-双(3-茚基)乙烷  分子式：C20H18  度：98.0%  小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

N-[Bis(methylthio)methylene]- p-sulfonamide  中文名：N-[双(甲硫基)亚甲基]对甲苯磺酰胺  分子式：C10H13NO2S3  度：98.0%  小鼠白介素2(IL-2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4,4'-Bis(5-methyl-2-benzoxazolyl)stilbene  中文名：4,4'-双(5-甲基-2-苯并恶唑基)芪  分子式：C30H22N2O2  度：98.0%  小鼠白介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

N,N-Bis(2-chloroethyl)-p-sulphonamide  中文名：N,N-双(2-氯乙基)对甲苯磺酰胺  分子式：C11H15Cl2NO2S  度：98.0%  小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠(NO)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  N-(2-methyl-4-oxopentan-2-yl)-sulfamethoxazole  中文名：  分子式：C16H21N3O4S  度：98.0%

小鼠(mouse NO)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Imidazo[1,2-b]pyridazine  中文名：  分子式：C6H5N3 

小鼠 IgG(mouse IgG)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 ADI  Azilsartan  147403-03-0  中文名：阿齐沙坦  分子式：C25H20N4O5  度：98.0%  关键词： 

小鼠 IGF-II (Mouse IGF-II) ELISA Kit   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D  Azathioprine  中文名：硫唑嘌呤  分子式：C9H7N7O2S  度：98.0%

小鼠 ACTH(mouse ACTH)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 Phoenix  Otophylloside F  250217-73-3  中文名：青阳参苷F  分子式：C48H76O16  度：95.0%  关键词：  抗; 孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
植物维生素D3elisa试剂盒   植物维生素D3试剂盒   规格型号：96T/48T   植物维生素D3试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：植物维生素D3试剂盒、植物维生素D3 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Tryptophan  153-94-6  中文名：  分子式：C11H12N2O2  度：98.0%  关键词： 

植物维生素D3(VD3)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Tricetyl fingolimod  162358-09-0  中文名：  分子式：C25H39NO5  度：98.0%  关键词： 

植物维生素D3(VD3)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Trillin  中文名：延龄草苷  分子式：C33H52O8 

植物维生素D2elisa试剂盒   植物维生素D2试剂盒   规格型号：96T/48T   植物维生素D2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：植物维生素D2试剂盒、植物维生素D2 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Testosterone benzoate  中文名：17-安息香酸雄烯醇酮  分子式：C26H32O3 

植物维生素D2(VD2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Tricetyl fingolimod  162358-09-0  中文名：  分子式：C25H39NO5
大鼠成纤维细胞现货供应Odoroside H  中文名：  分子式：C30H46O8    小鼠多巴胺(DA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

O-Benzyl-L-tyrosine  中文名：O-苄基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3    小鼠高灵敏度促甲状腺激素(U-TSH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

O-Benzyl-L-serine  中文名：O-苄基-L-丝氨酸  分子式：C10H13NO3    小鼠高敏甲状腺素(u-T4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

n-Tritriacontan-16,18-dione  中文名：  分子式：C33H64O2    中文名称   方法   规格

Norfloxacin lactate  中文名：乳酸诺氟沙星  分子式：C19H24FN3O6    小鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。