使用方法：
收到细胞大鼠腹水癌细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 大鼠腹水癌细胞价格
简称：Walker256

种属：大鼠

来源：腹水癌

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0668

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

(S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  中文名：(s)-4-(4-氨基苄基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2    小鼠高迁移率族蛋白(mouse HMGB1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

(S)-(+)-4-Benzyl-3-propionyl-2-oxazolidinone  中文名：(S)-(+)-4-苄基-3-丙酰-2-恶唑烷酮  分子式：C13H15NO3    小鼠组胺(HIS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

(S)-(-)-2-Amino-3-methyl-1,1-diphenyl-1-butanol  中文名：(S)-(-)-2-氨基-3-甲基-1,1-二苯基-1-丁醇  分子式：C17H21NO    小鼠总蛋白（TP）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

(R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol  中文名：  分子式：C10H12O2    小鼠总胆固醇（TC）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

(R)-4-Methoxydalbergione  中文名：(R)-4-甲氧基黄檀醌  分子式：C16H14O3    小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠紧张素转化酶(ACE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate  161798-01-2  中文名：  分子式：C14H13NO4S 

小鼠紧张素转化酶(ACE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Bisdemethoxycucurmin  中文名：双去甲氧基姜黄素  分子式：C19H16O4 

小鼠紧张素转化酶   英文名称：   Angiotensin Conveing Enzyme   规格：   48T/96T   英文缩写：   ACE  Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  中文名：  分子式：Methyl 2-bromomethyl-3-nitrobenzoate  度：98.0%

小鼠紧张素原elisa试剂盒   小鼠紧张素原试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠紧张素原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠紧张素原试剂盒、小鼠紧张素原elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Methyl 2-ethoxybenzimidazole-7-carboxylate  中文名：  分子式：C11H12N2O3 

小鼠紧张素原(aGT)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Methyl 2,2-dithienylglycolate  中文名：  分子式：C11H10O3S2  度：98.0%
N-Acetyl-D-tryptophan  2280/1/5  中文名：N-乙酰基-D-色氨酸  分子式：C13H14N2O3    三0酸腺苷酶   英文名称：   Adenosine iphosphate   规格：   48T/96T   英文缩写：   ATP

Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2    紧张素Ⅱ一型受体抗原   英文名称：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aigen   规格：   48T/96T   英文缩写：   AT1R

2-Aminofluorene  153-78-6  中文名：2-氨基芴  分子式：C13H11N    素‖受体︱型自身抗体   英文名称：   Angiotensin 2 Receptor 1 Aoaibodies   规格：   48T/96T   英文缩写：   AT1R-AA

(1R,2S)-1-Amino-2-indanol  136030-00-7  中文名：(1R,2S)-1-氨基-2-茚醇  分子式：C9H11NO    紧张素Ⅰ   英文名称：   AngiotensinⅠ   规格：   48T/96T   英文缩写：   ANGⅠ

Amitraz  33089-61-1  中文名：双甲眯  分子式：C19H23N3    三(羟甲基)基盐酸盐   100g
大鼠腹水癌细胞价格普氏立克次体(RP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T  3-Amino-3-phenylpropionic acid  中文名：C9H11NO2  分子式：C9H11NO2  度：98.0%

葡萄糖氧化酶（GOD）测试盒   可见分光光度法   50管/48样  Pirfenidone  中文名：哌非尼酮  分子式：C12H11NO 

葡萄糖激酶   英文名称：   Human Glucokinase   规格：   48T/96T   英文缩写：   GCK  Androstanolone heptanoate  中文名：雄诺龙庚酸酯  分子式：C26H42O3  度：98.0%

葡萄糖-6-0酸脱氢酶（G－6－PD）检测   BN N-ACETYL-D-GLUCOSAMINIDASE (NAG) detection                 Prilocaine   1786-81-8  中文名：盐酸丙胺卡因  分子式：C13H21ClN2O 

葡萄糖60酸脱氢酶   英文名称：   Human Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase   规格：   48T/96T   英文缩写：   G6PD  Androstanolone heptanoate  中文名：雄诺龙庚酸酯  分子式：C26H42O3

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。