使用方法：
收到细胞大鼠肝星状细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 大鼠肝星状细胞特价
简称：rHSC-99

种属：大鼠

来源：肝星状细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0555

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

1-(4-Fluorobenzyl)-2-chlorobenzimidazole  中文名：  分子式：C14H10ClFN2    小鼠透明质酸结合蛋白elisa试剂盒   小鼠透明质酸结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠透明质酸结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠透明质酸结合蛋白试剂盒、小鼠透明质酸结合蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

1-(4-(3-Chloropropoxy)-3-methoxyphenyl)ethanone  中文名：  分子式：C12H15ClO3    小鼠糖蛋白elisa试剂盒   小鼠糖蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠糖蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠糖蛋白试剂盒、小鼠糖蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

1-(2-Chloroacetyl)pyrrolidine-2-carbonitrile  中文名：  分子式：C7H9ClN2O    小鼠酶elisa试剂盒   小鼠酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠酶试剂盒、小鼠酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

1-(2-Amino-5-chlorophenyl)-1-(trifluoromethyl)-3-cyclopropyl-2-propyn-1-ol  中文名：  分子式：C13H11ClF3NO    小鼠组胺elisa试剂盒   小鼠组胺试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠组胺试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠组胺试剂盒、小鼠组胺elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

(Z)-Lachnophyllum lactone  中文名：  分子式：C10H10O2    小鼠坏死因子可溶性受体elisa试剂盒   小鼠坏死因子可溶性受体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠坏死因子可溶性受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠坏死因子可溶性受体试剂盒、小鼠坏死因子可溶性受体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
小鼠内皮细胞生长因子(VEGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Boc-3-Phenylisoserine  中文名：  分子式：C14H19NO5  度：98.0%

小鼠内皮生长因子受体-2(mouse VEGF R2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Methylprednisolone  中文名：甲基泼尼松龙  分子式：C22H30O5 

小鼠内皮生长因子受体 2(mouse VEGF-R2)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D  Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  中文名：  分子式：C22H19N3O2 

小鼠内皮生长因子受体 -1(mouse VEGF-R1)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D  Methyl 3-amino-2-[[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]amino]benzoate  中文名：  分子式：C22H19N3O2  度：98.0%

小鼠内皮生长因子elisa试剂盒   小鼠内皮生长因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠内皮生长因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠内皮生长因子试剂盒、小鼠内皮生长因子elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Methyl 4-O-feruloylquinate  中文名：  分子式：C18H22O9
Allyl phenoxyacetate  7493-74-5  中文名：苯氧乙酸烯丙酯  分子式：C11H12O3    还原糖含量测试盒   可见分光光度法   50管/24样

2-Allylphenol  1745-81-9  中文名：2-烯丙基酚  分子式：C9H10O    纤维素酶（CL）测试盒   可见分光光度法   50管/24样           

2-Amino-2'-chloro-5-nitro benzophenone  2011-66-7  中文名：2-氨基-5-硝基-2'-氯二苯甲酮  分子式：C13H9ClN2O3    三乙酸   100g

6-Chloroguanine riboside  2004/7/1  中文名：6-氯鸟嘌呤核苷  分子式：C10H12ClN5O4    ichloroaceticAcid   500g

5-Acetyl-3-chloro-10,11-dihydro-5H-dibenz[b,f]azepine  25961-11-9  中文名：  分子式：C16H14ClNO    N-三(羟甲基)甲基甘酸   500g
大鼠肝星状细胞特价其它天然产物        兔子葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Taxilluside A  中文名：  分子式：C18H24O10  度：97.5%  兔子上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

n-Butyl β-D-fructofuranoside  中文名：基-β-D-果糖苷  分子式：C10H20O6  度：97.0%  兔子神经营养因子4(-4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Palmitone  中文名：棕榈酮  分子式：C31H62O  度：98.0%  兔子神经营养因子3(-3)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid  中文名：  分子式：C18H30O3  度：95.0%  兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。