使用方法：
收到细胞大鼠脑微内皮细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 大鼠脑微内皮细胞现货供应
简称：RBMEC

种属：大鼠

来源：脑微；内皮细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0780

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

19-Nortestosterone acetate  1425-10-1  中文名：19-去甲睾酮乙酸盐  分子式：C20H28O3  度：98.0%  关键词：    小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(mouse BMP-R2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名：  分子式：C33H66O2  度：98.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠脑肽(mouse BNP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

17β-Hydroxy-17-methylandrosta-4,9(11)-dien-3-one  1039-17-4  中文名：17β-羟基-17-甲基雄甾-4,9(11)-二烯-3-酮  分子式：C20H28O2  度：98.0%  关键词：    小鼠N端前脑素(mouse -proBNP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  19041-66-8  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3  度：98.0%      小鼠骨唾液酸蛋白(mouse BSP)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13  度：%  关键词：  强心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠骨成型蛋白受体Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠白介素-27   英文名称：   ierleukin-27   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-27  Canrenone  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3 

小鼠白介素-23(mouse IL-23)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Catalponol  34168-56-4  中文名：  分子式：C15H18O2  度：98.0%  关键词：  梓; 四氢萘酮; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠白介素23(IL-23)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Catalpalactone  1585-68-8  中文名：  分子式：C15H14O4  度：%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠白介素23(IL-23)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Catalponol methylthiomethyl ether  1432057-74-3  中文名：  分子式：C17H22O2S 

小鼠白介素-23   英文名称：    ierleukin-23   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-23  Canrenone  中文名：坎利酮  分子式：C22H28O3  度：98.0%
猪特定基因序列(Porcine)核酸检测试剂盒   48T                 Roflumilast  162401-32-3  中文名：罗氟司特  分子式：C17H14Cl2F2N2O3 

猪髓0脂碱性蛋白elisa试剂盒   猪髓0脂碱性蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   猪髓0脂碱性蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪髓0脂碱性蛋白试剂盒、猪髓0脂碱性蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Sitafloxacin  中文名：西他沙星  分子式：C19H18ClF2N3O3  度：98.5%

猪髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Sibiricose A1  139726-40-2  中文名：6'-芥子酰基蔗糖  分子式：C23H32O15 

猪髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Stigmastane-3β,5α,6β-triol  中文名：豆甾-3β,5α,6β-三醇  分子式：C29H52O3  度：96.5%

猪水通道蛋白4（AQP4）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Sitagliptin phosphate  中文名：无水磷酸西他列汀  分子式：C16H18F6N5O5P  度：98.0%
大鼠脑微内皮细胞现货供应Prosapogenin A  中文名：薯蓣次皂苷A  分子式：C39H62O12  度：%  兔热休克蛋白70elisa试剂盒   兔热休克蛋白70试剂盒   规格型号：96T/48T   兔热休克蛋白70试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔热休克蛋白70试剂盒、兔热休克蛋白70elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

2''-O-Acetylsprengerinin C  中文名：  分子式：C46H72O17  度：%  兔热休克蛋白40elisa试剂盒   兔热休克蛋白40试剂盒   规格型号：96T/48T   兔热休克蛋白40试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔热休克蛋白40试剂盒、兔热休克蛋白40 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Dehydroepiandrosterone  中文名：脱氢表雄酮  分子式：C19H28O2  度：99.0%  兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Gracillin  中文名：纤细薯蓣皂苷  分子式：C45H72O17  度：98.0%  兔抗糖蛋白抗体(GP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.5%  兔抗单核细胞抗体(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。