公司产品仅用于科研
中文名称： 大鼠正常肾成纤维细胞直销
简称：NRK-49F

种属：大鼠

来源：肾；成纤维细胞；自发永生

培养基：EMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0331
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞大鼠正常肾成纤维细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C16H15F2NO4    幽门螺旋杆菌球蛋白Y   英文名称：   Human Helicobacter pylori IgY   规格：   48T/96T   英文缩写：   HP-IgY

1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid  中文名：  分子式：C14H11F2NO4    病毒抗体IgG   英文名称：   Human Hepatitis A Virus IgG   规格：   48T/96T   英文缩写：   HAV IgG

1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  中文名：  分子式：C9H15ClO3    病毒e抗原   英文名称：   Human Hepatitis B e Aigen   规格：   48T/96T   英文缩写：   HBeAg

1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C12H7ClOS    链球菌(ST)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T

1-Chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C13H9ClOS    病毒(MV)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T
小鼠调节蛋白   英文名称：   thrombomodulin   规格：   48T/96T   英文缩写：   TM  Folic acid  中文名：叶酸  分子式：C19H19N7O6 

小鼠素elisa试剂盒   小鼠素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠素试剂盒、小鼠素elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Metronidazole  中文名：甲硝唑  分子式：C6H9N3O3  度：99.0%

小鼠素B2(TXB2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Minoxidil  38304-91-5  中文名：米诺地尔  分子式：C9H15N5O  度：98.0%  关键词： 

小鼠素B2(TXB2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Campsiketalin  中文名：  分子式：C10H20O4 

小鼠素A2（TXA2）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Minoxidil  38304-91-5  中文名：米诺地尔  分子式：C9H15N5O
2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3    I 型胶原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

p-Anisoin  119-52-8  中文名：对茴香偶姻  分子式：C16H16O4     (NO)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Benzoin  119-53-9  中文名：安息香  分子式：C14H12O2    神经生长因子   英文名称：    nerve growth factor    规格：   48T/96T   英文缩写：   NGF

3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亚苄基苯酞  分子式：C15H10O2    神经生长因子受体   英文名称：    nerve growth factor  receptor   规格：   48T/96T   英文缩写：   NGFR

L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天门冬氨酸  分子式：C4H7NO4    中性粒细胞明胶酶相关性载脂蛋白   英文名称：   Neuophil gelatinase-associated lipocalin   规格：   48T/96T   英文缩写：   NGAL
大鼠正常肾成纤维细胞直销人肌联蛋白   英文名称：   Human titin   规格：   48T/96T   英文缩写：   TTN  Rivaroxaban  366789-02-8  中文名：利伐沙班  分子式：C19H18ClN3O5S  度：98.0%  关键词： 

人骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Thiamphenicol  15318-45-3  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S  度：98.0%  关键词： 

人骨特异性碱性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3,3'-Sulfonyldianiline  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S  度：98.0%

人骨胶原交联(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3 

人骨钙素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              3,3'-Sulfonyldianiline  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。