公司产品仅用于科研
中文名称： 大鼠心肌微内皮细胞现货供应
简称：CMECs

种属：大鼠

来源：心肌微；内皮细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0645
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞大鼠心肌微内皮细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone  2958-36-3  中文名：2-氨基-2',5-二氯二苯酮  分子式：C13H9Cl2NO  度：99.0%  关键词：    小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

2-Allylphenol  1745-81-9  中文名：2-烯丙基酚  分子式：C9H10O  度：98.0%  关键词：    小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  关键词：    小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-Acetylbutyrolactone  517-23-7  中文名：2-乙酰基丁内酯  分子式：C6H8O3  度：98.0%  关键词：    小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-Acetyl-6-methoxynaphthalene  3900-45-6  中文名：6-甲氧基-2-乙酰萘  分子式：C13H12O2  度：99.0%  关键词：    小鼠坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠补体C*(mouse C*)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Benzo-15-crown 5-ether  中文名：苯并-15-冠5-醚  分子式：C14H20O5 

小鼠补体C3a(mouse C3a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Benzo-15-crown 5-ether  中文名：苯并-15-冠5-醚  分子式：C14H20O5  度：98.0%

小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Chrysophanol 8-O-glucoside  13241-28-6  中文名：  分子式：C21H20O9  度：97.5%  关键词：  抗血小板; 抗凝; 大黄属; 鼠李属; 酸模属; 蒽醌苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠病毒（MVM）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Losartan  114798-26-4  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O  度：98.0%  关键词： 

小鼠表皮调节素elisa试剂盒   小鼠表皮调节素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠表皮调节素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠表皮调节素试剂盒、小鼠表皮调节素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Lamivudine  134678-17-4  中文名：拉米夫定  分子式：3O3S  度：98.0%  关键词：
猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sarmentocymarin  中文名：  分子式：C30H46O8 

猪胰岛素样生长因子   英文名称：   Porcine Insulin-like Growth Factor-1   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGF-1  S-Benzyl-L-cysteine  中文名：S-苄基-L-半胱氨酸  分子式：C10H13NO2S  度：98.0%

猪胰岛素elisa试剂盒   猪胰岛素试剂盒   规格型号：96T/48T   猪胰岛素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪胰岛素试剂盒、猪胰岛素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Sarsasapogenin  中文名：菝葜皂苷元  分子式：C27H44O3 

猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Sarafloxacin   91296-87-6  中文名：盐酸沙拉沙星  分子式：C20H18ClF2N3O3 

猪胰岛素(INS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sarmentocymarin  98633-61-5  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.0%  关键词：  ; 杀虫; 毒毛旋花子; 强心苷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
大鼠心肌微内皮细胞现货供应rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  2-Amino-3-methylbenzoic acid  中文名：2-氨基-3-甲基苯甲酸  分子式：C8H9NO2  度：98.0%

RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔A1c(A1c)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-Amino-6-chloropurine  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5 

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-Amino-6-chlorobenzothiazole  95-24-9  中文名：2-氨基-6-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S 

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装  2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione  1971-49-9  中文名：2-乙酰基-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮  分子式：C10H7NO3  度：93.0%  关键词： 

Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒规格：96T/48T  2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。