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产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | AE0645 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 心肌微血管;内皮细胞 |
细胞形态 | 贴壁 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | 大鼠 |
包装规格 | 1×106 |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
公司产品仅用于科研
中文名称: 大鼠心肌微内皮细胞现货供应
简称:CMECs
种属:大鼠
来源:心肌微;内皮细胞
培养基:DMEM
状态:贴壁
产品规格:1×106
单位:T25/瓶
货号:AE0645
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到细胞大鼠心肌微内皮细胞现货供应后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
2-Amino-2',5-dichlorobenzophenone 2958-36-3 中文名:2-氨基-2',5-二氯二苯酮 分子式:C13H9Cl2NO 度:99.0% 关键词: 小鼠超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Allylphenol 1745-81-9 中文名:2-烯丙基酚 分子式:C9H10O 度:98.0% 关键词: 小鼠β2糖蛋白1抗体IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISAKit ELISA. 96T/48T
2-Acetylfluorene 781-73-7 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 关键词: 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
2-Acetylbutyrolactone 517-23-7 中文名:2-乙酰基丁内酯 分子式:C6H8O3 度:98.0% 关键词: 小鼠坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
2-Acetyl-6-methoxynaphthalene 3900-45-6 中文名:6-甲氧基-2-乙酰萘 分子式:C13H12O2 度:99.0% 关键词: 小鼠坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
小鼠补体C*(mouse C*) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Benzo-15-crown 5-ether 中文名:苯并-15-冠5-醚 分子式:C14H20O5
小鼠补体C3a(mouse C3a) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 Benzo-15-crown 5-ether 中文名:苯并-15-冠5-醚 分子式:C14H20O5 度:98.0%
小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Chrysophanol 8-O-glucoside 13241-28-6 中文名: 分子式:C21H20O9 度:97.5% 关键词: 抗血小板; 抗凝; 大黄属; 鼠李属; 酸模属; 蒽醌苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
小鼠病毒(MVM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Losartan 114798-26-4 中文名:氯沙坦 分子式:C22H23ClN6O 度:98.0% 关键词:
小鼠表皮调节素elisa试剂盒 小鼠表皮调节素试剂盒 规格型号:96T/48T 小鼠表皮调节素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:小鼠表皮调节素试剂盒、小鼠表皮调节素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Lamivudine 134678-17-4 中文名:拉米夫定 分子式:3O3S 度:98.0% 关键词:
猪胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T Sarmentocymarin 中文名: 分子式:C30H46O8
猪胰岛素样生长因子 英文名称: Porcine Insulin-like Growth Factor-1 规格: 48T/96T 英文缩写: IGF-1 S-Benzyl-L-cysteine 中文名:S-苄基-L-半胱氨酸 分子式:C10H13NO2S 度:98.0%
猪胰岛素elisa试剂盒 猪胰岛素试剂盒 规格型号:96T/48T 猪胰岛素试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:猪胰岛素试剂盒、猪胰岛素eisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 Sarsasapogenin 中文名:菝葜皂苷元 分子式:C27H44O3
猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Sarafloxacin 91296-87-6 中文名:盐酸沙拉沙星 分子式:C20H18ClF2N3O3
猪胰岛素(INS)ELISAKit ELISA. 96T/48T Sarmentocymarin 98633-61-5 中文名: 分子式:C30H46O8 度:98.0% 关键词: ; 杀虫; 毒毛旋花子; 强心苷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
大鼠心肌微内皮细胞现货供应rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 2-Amino-3-methylbenzoic acid 中文名:2-氨基-3-甲基苯甲酸 分子式:C8H9NO2 度:98.0%
RabbitGlycatedhemoglobinA1c,A1cELISAKit兔A1c(A1c)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Amino-6-chloropurine 中文名:2-氨基-6-氯嘌呤 分子式:C5H4ClN5
RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Amino-6-chlorobenzothiazole 95-24-9 中文名:2-氨基-6-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S
RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit 兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放多肽(GIP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 2-Acetyl-1H-Isoindole-1,3(2H)-Dione 1971-49-9 中文名:2-乙酰基-1H-异吲哚-1,3(2H)-二酮 分子式:C10H7NO3 度:93.0% 关键词:
Rabbitglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit兔子神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T 2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole 2349-67-9 中文名:2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑 分子式:C2H3N3S2
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。