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产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | AE0326 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | 关节;成纤维细胞;SV40转化;女性 |
细胞形态 | 贴壁 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | 人 |
包装规格 | 1×106 |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
公司产品仅用于科研
中文名称: 成纤维细胞特价
简称:MH7A
种属:人
来源:关节;成纤维细胞;SV40转化;女性
培养基:DMEM
状态:贴壁
产品规格:1×106
单位:T25/瓶
货号:AE0326
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到细胞成纤维细胞特价后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
2-Aminothiazol-4-acetic acid 中文名:2-氨基噻唑-4-乙酸 分子式:C5H6N2O2S 度:98.0% 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Ampicillin Trihydrate 中文名:氨苄西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0% 小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
2-Acetylfluorene 中文名:2-乙酰芴 分子式:C15H12O 度:98.0% 小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole 中文名:1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑 分子式:C8H12N2 度:98.0% 小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 中文名:(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:99.0% 小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
维生素B2/核黄素 英文名称: Human Vitamin B2 规格: 48T/96T 英文缩写: VB2 Androstadienedione 897-06-3 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 度:98.0% 关键词:
维生素B2(VB2)检测 Detection of malic dehydrogenase Androstadienedione 中文名:1,4-雄烯二酮 分子式:C19H24O2 度:98.0%
维生素B1(VB1)检测 The total amino acid (TAA) detection Androstanolone 17-benzoate 1057-07-4 中文名:雄诺龙苯甲酸酯 分子式:C26H34O3
微量游离血红蛋白测试盒 ace free hemoglobin test case Retigabine 150812-12-7 中文名:瑞替加滨 分子式:C16H18FN3O2
微量游离血红蛋白(FHb)测定试剂盒(比色法) Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt 中文名: 分子式:C28H42N6O8S2
鱼脱酶3(DIO3)ELISA检测试剂盒 96T/48T ELISA 组装/原装 Uzarigenin 466-09-1 中文名: 分子式:C23H34O4 度:97.5% 关键词: 强心剂; ; 强心苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
鱼脱酶2(DIO2)ELISA检测试剂盒 96T/48T ELISA 组装/原装 Uzarigenin 466-09-1 中文名: 分子式:C23H34O4
鱼糖胺聚糖(GAG)ELISA检测试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Zolmitriptan 中文名:佐米曲普坦 分子式:C16H21N3O2 度:98.0%
鱼尿苷二0酸葡萄糖酸转移酶(UDPGT)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Zolmitriptan 中文名:佐米曲普坦 分子式:C16H21N3O2
鱼球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 Zolmitriptan 139264-17-8 中文名:佐米曲普坦 分子式:C16H21N3O2 度:98.0% 关键词:
成纤维细胞特价Nebivolol 中文名:盐酸奈必洛尔 分子式:C22H26ClF2NO4 度:98.0% 小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Erlotinib 中文名:盐酸埃罗替尼 分子式:C22H24ClN3O4 度:98.0% 小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Empagliflozin 中文名:依帕列净 分子式:C23H27ClO7 度:95.0% 小鼠骨胶原交联(Cr)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan 中文名: 分子式:C17H16ClIO2 度:98.0% 小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Bortezomib 中文名:硼替佐米 分子式:C19H25BN4O4 度:98.0% 小鼠胆囊收缩素8(CCK-8)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。