公司产品仅用于科研
中文名称： 成纤维细胞特价
简称：MH7A

种属：人

来源：关节；成纤维细胞；SV40转化；女性

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0326
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞成纤维细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
2-Aminothiazol-4-acetic acid  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S  度：98.0%  小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Ampicillin Trihydrate  中文名：氨苄西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S  度：98.0%  小鼠β酚(β-naphthol)LISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

2-Acetylfluorene  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O  度：98.0%  小鼠β内啡肽受体(β-EPR)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  中文名：1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式：C8H12N2  度：98.0%  小鼠β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO  度：99.0%  小鼠β甘露糖苷酶(βManase)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
维生素B2/核黄素   英文名称：   Human Vitamin B2   规格：   48T/96T   英文缩写：   VB2  Androstadienedione  897-06-3  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%  关键词： 

维生素B2（VB2）检测   Detection of malic dehydrogenase  Androstadienedione  中文名：1,4-雄烯二酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

维生素B1（VB1）检测   The total amino acid (TAA) detection  Androstanolone 17-benzoate  1057-07-4  中文名：雄诺龙苯甲酸酯  分子式：C26H34O3 

微量游离血红蛋白测试盒   ace free hemoglobin test case                 Retigabine  150812-12-7  中文名：瑞替加滨  分子式：C16H18FN3O2 

微量游离血红蛋白（FHb）测定试剂盒（比色法）  Precursor of cefcapene diisopropylanmine salt  中文名：  分子式：C28H42N6O8S2
鱼脱酶3（DIO3）ELISA检测试剂盒   96T/48T   ELISA   组装/原装  Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4  度：97.5%  关键词：  强心剂; ; 强心苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

鱼脱酶2（DIO2）ELISA检测试剂盒   96T/48T   ELISA   组装/原装           Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4 

鱼糖胺聚糖(GAG)ELISA检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%

鱼尿苷二0酸葡萄糖酸转移酶（UDPGT）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Zolmitriptan  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2 

鱼球蛋白M（IgM）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Zolmitriptan  139264-17-8  中文名：佐米曲普坦  分子式：C16H21N3O2  度：98.0%  关键词：
成纤维细胞特价Nebivolol   中文名：盐酸奈必洛尔  分子式：C22H26ClF2NO4  度：98.0%  小鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Erlotinib   中文名：盐酸埃罗替尼  分子式：C22H24ClN3O4  度：98.0%  小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Empagliflozin  中文名：依帕列净  分子式：C23H27ClO7  度：95.0%  小鼠骨胶原交联(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  中文名：  分子式：C17H16ClIO2  度：98.0%  小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Bortezomib  中文名：硼替佐米  分子式：C19H25BN4O4  度：98.0%  小鼠胆囊收缩素8（CCK-8）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。