使用方法：
收到细胞成纤维样滑膜细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 成纤维样滑膜细胞特价
简称：HFLS-RA

种属：人

来源：关节；成纤维细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0496

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

2-Chloro-1-(5'-(prop-1-ynyl)-2,2'-bithiophen-5-yl)ethanol  114916-00-6  中文名：  分子式：C13H11ClOS2  度：98.5%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠基质金属蛋白酶-9(mouse MMP-9)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

2-Carbamoyl-3-hydroxy-1,4-naphthoquinone  103646-20-4  中文名：  分子式：C11H7NO4  度：%  关键词：    小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-Benzylsuccinic acid  3972-36-9  中文名：  分子式：C11H12O4  度：98.0%  关键词：    小鼠肌酸激酶(CK)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-Benzylacrylic acid  5669-19-2  中文名：  分子式：C10H10O2  度：98.0%  关键词：    小鼠抑制素/肌抑素（MSTN）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-苄基-2-(二甲基氨基)-4'-吗啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%      小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠雌二醇受体elisa试剂盒   小鼠雌二醇受体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠雌二醇受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠雌二醇受体试剂盒、小鼠雌二醇受体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Citrostadienol  中文名：柠檬二烯醇  分子式：C30H50O 

小鼠雌二醇受体(ER)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Citrostadienol  474-40-8  中文名：柠檬二烯醇  分子式：C30H50O 

小鼠雌二醇受体(ER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Deflazacort  中文名：地夫可特  分子式：C25H31NO6 

小鼠雌二醇(mouse E2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Fludarabine  中文名：氟达拉宾  分子式：C10H12FN5O4 

小鼠雌二醇(E2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Citreorosein  中文名：ω-羟基大黄素  分子式：C15H10O6  度：97.0%
猪脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Telmisartan  144701-48-4  中文名：替米沙坦  分子式：C33H30N4O2 

猪载脂蛋白B100elisa试剂盒   猪载脂蛋白B100试剂盒   规格型号：96T/48T   猪载脂蛋白B100试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪载脂蛋白B100试剂盒、猪载脂蛋白B100eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Rubiadin  117-02-2  中文名：甲基异茜草素  分子式：C15H10O4  度：99.0%  关键词：  木巴戟属; 茜草属; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

猪载脂蛋白B100(apo-B100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sulfaguanidine  57-67-0  中文名：磺胺脒  分子式：C7H10N4O2S  度：99.0%   

猪载脂蛋白B（Apo-B）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Rubianthraquinone  中文名：  分子式：C16H12O5  度：98.0%

猪载脂蛋白A1elisa试剂盒   猪载脂蛋白A1试剂盒   规格型号：96T/48T   猪载脂蛋白A1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪载脂蛋白A1试剂盒、猪载脂蛋白A1eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Rubiadin  117-02-2  中文名：甲基异茜草素  分子式：C15H10O4
成纤维样滑膜细胞特价Ranolazine  95635-55-5  中文名：雷诺嗪  分子式：C24H33N3O4  度：98.0%  关键词：    小鼠胰岛素(INS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ranitidine   66357-59-3  中文名：盐酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S  度：98.0%  关键词：    小鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S  度：98.0%  关键词：    小鼠血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Raltegravir  518048-05-0  中文名：雷特格韦  分子式：C20H21FN6O5  度：98.0%  关键词：    小鼠血红素氧合酶1(HO-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Racecadotril  81110-73-8  中文名：消旋卡多曲  分子式：C21H23NO4S  度：98.0%  关键词：    小鼠性因子/瑞斯托霉素辅因子(vWF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。