使用方法：
收到细胞人细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人细胞直销
简称：GEO

种属：人

来源：

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0457

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  中文名：  分子式：C6H12O2    乙酰胆碱酯酶（AchE）试剂盒   可见分光光度法   50管/48样

3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol  中文名：  分子式：C19H31NO5    组织及血液酸性0酸酶（ACP）试剂盒   可见分光光度法   50管/24样

3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C19H15BrFN    组织及血液碱性0酸酶（AKP/ALP）试剂盒   可见分光光度法   50管/24样           

3-(Boc-Amino)piperidine  中文名：  分子式：C10H20N2O2    血清铁   英文名称：   Human serum Lron   规格：   48T/96T   英文缩写：   Lron

3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8    可溶性ENG/sCD105   英文名称：   Human soluble Endoglin   规格：   48T/96T   英文缩写：   ENG/sCD105
小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Catalpalactone  中文名：  分子式：C15H14O4 

小鼠抑制素A(INH-A)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  N6-Benzyladenine  中文名：N6-苄基腺嘌呤  分子式：C12H11N5 

小鼠抑制素A   英文名称：   Insulin A   规格：   48T/96T   英文缩写：   Inhibin A  N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine  中文名：N6-苯甲酰基-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脱氧腺苷  分子式：C38H35N5O6  度：98.0%

小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     Benserazide   中文名：盐酸苄丝肼  分子式：C10H16ClN3O5 

小鼠抑瘤素Melisa试剂盒   小鼠抑瘤素M试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠抑瘤素M试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抑瘤素M试剂盒、小鼠抑瘤素Melisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  N-Acetyl-5-hydroxytryptamine  1210-83-9  中文名：N-乙酰基-5-羟基色胺  分子式：C12H14N2O2  度：99.0%  关键词：
Amitriptyline   549-18-8  中文名：盐酸阿米替林  分子式：C20H24ClN    0酸化SMAD2/3抗体   英文名称：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   规格：   48T/96T   英文缩写：   PSMAD2/3 Ab

2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S    0酸化核因子κB   英文名称：   Human phosphor-Nuclear Factor kappa B   规格：   48T/96T   英文缩写：   pNFκB

8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S    羧酸酯酶（CarE）测试盒   可见分光光度法   50管/48样

2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巯基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2    线粒体呼吸链复合体Ⅱ活性测试盒   可见分光光度法   25管/24样

2-Amino-5-nitrobenzophenone  1775-95-7  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3    线粒体呼吸链复合体Ⅲ活性测试盒   可见分光光度法   25管/24样
人细胞直销人脂蛋白脂酶elisa试剂盒   人脂蛋白脂酶试剂盒   规格型号：96T/48T   人脂蛋白脂酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：人脂蛋白脂酶试剂盒、人脂蛋白脂酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  中文名：2-苄基-2-(二甲基氨基)-4'-吗啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%

人脂蛋白脂酶(LPL)酶联吸附测定试剂盒   Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit  2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S  度：98.0%

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           2-Benzylsuccinic acid  中文名：  分子式：C11H12O4 

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-苄基-2-(二甲基氨基)-4'-吗啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%   

人脂蛋白关联0脂酶A2(LpPLA2)酶联吸附测定试剂盒   Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit  2-Aminothiazol-4-acetic acid  29676-71-9  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。