基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 人肺巨细胞癌细胞(高转移)直销
简称：95D

种属：人

来源：巨细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0170

使用方法：
收到细胞人肺巨细胞癌细胞(高转移)直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O5    鸭子白介素12（IL-12）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine  中文名：  分子式：C7H7Cl2N3O2S    鸭子β干扰素(IFN-β/IFNB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine  中文名：  分子式：C7H9Cl2N3S    鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

4,5-Di-O-caffeoylquinic acid methyl ester  中文名：4,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯  分子式：C26H26O12    鸭脂肪酸合成酶（FAS）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4,5-Dimethoxy-1-cyanobenzocyclobutane  中文名：  分子式：C11H11NO2    鸭脂肪甘油三酯酯酶（ATGL）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  n-Butyl-β-D-fructopyranoside  中文名：  分子式：C10H20O6  度：%

小鼠转化生长因子β1(TGF-β1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Ethopabate  1959/6/3  中文名：乙氧酰胺苯甲酯  分子式：C12H15NO4 

小鼠转化生长因子-β1   英文名称：   Ttansforming Growth Factor -β1   规格：   48T/96T   英文缩写：   TGF-β1  n-Butyl β-D-fructofuranoside  中文名：基-β-D-果糖苷  分子式：C10H20O6  度：97.0%

小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  n-Butyl-β-D-fructopyranoside  中文名：  分子式：C10H20O6 

小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  L-Aspartic acid  中文名：L-天门冬氨酸  分子式：C4H7NO4
Afatinib  850140-72-6  中文名：阿法替尼  分子式：C24H25ClFN5O3    兔素(rabbit Renin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

9-Hydroxy-4-androstene-3,17-dione  560-62-3  中文名：9-羟基-4-雄甾烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3    兔S100b   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

7-Amino-4-methylcoumarin  26093-31-2  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2    兔8-异构素(8-epi-PGF2α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Indometacin  53-86-1  中文名：吲哚美辛  分子式：C19H16ClNO4    兔子血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Dexamethasone 21-phosphate di salt  2392-39-4  中文名：地塞米松磷酸钠  分子式：C22H30FO8P    兔子β血小板球蛋白/β环蛋白(β-TG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人肺巨细胞癌细胞(高转移)直销人转铁蛋白（F）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  143612-79-7  中文名：  分子式：C13H13ClN2  度：98.0%  关键词： 

人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-(4-Chlorobutyl)indole-5-carbonitrile  143612-79-7  中文名：  分子式：C13H13ClN2 

人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one  85175-59-3  中文名：  分子式：C15H18ClNO3  度：98.0%  关键词： 

人转录因子   英文名称：   Human Engrailed-2   规格：   48T/96T   英文缩写：   EN-2  3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole  87691-87-0  中文名：  分子式：C11H13N3S  度：98.0%  关键词： 

人转录激活因子6(ATF6)酶联吸附测定试剂盒   Human ATF6 (Activating anscription Factor 6) ELISA Kit  2''-O-Acetylsprengerinin C  1220707-33-4  中文名：  分子式：C46H72O17