使用方法：
收到细胞人肝内细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人肝内细胞现货供应
简称：LICCF

种属：人

来源：肝内

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0897

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

4-Oxododecanedioic acid  30828-09-2  中文名：  分子式：C12H20O5  度：95.0%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4-O-(3-nitropropanoyl)corollin  122475-42-7  中文名：  分子式：C18H24N4O18  度：%  关键词：    小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

4-Methylamino-3-nitrobenzoic acid  41263-74-5  中文名：  分子式：C8H8N2O4  度：98.0%  关键词：    小鼠抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

4-Methyl-2-propyl-1H-benzimidazole-6-carboxylic acid  152628-03-0  中文名：  分子式：C12H14N2O2  度：98.0%  关键词：    小鼠抗肌内膜抗体IgA(EMAIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

4-Methoxy-5-(3-morpholinopropoxy)-2-nitrobenzonitrile  675126-26-8  中文名：  分子式：C15H19N3O5  度：98.0%  关键词：    小鼠铁蛋白(FE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠钙通道阻滞剂elisa试剂盒   小鼠钙通道阻滞剂试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠钙通道阻滞剂试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠钙通道阻滞剂试剂盒、小鼠钙通道阻滞剂eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Danshenxinkun A  65907-75-7  中文名：丹参新醌甲  分子式：C18H16O4  度：98.0%  关键词：  细胞毒活性; 鼠尾草属; 二萜醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Dasatinib  中文名：达沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S  度：98.0%

小鼠钙通道阻滞剂(CCB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ethyl β-D-fructofuranoside  1820-84-4  中文名：乙基-β-D-果糖苷  分子式：C8H16O6  度：97.0%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠钙结合蛋白elisa试剂盒   小鼠钙结合蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠钙结合蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠钙结合蛋白试剂盒、小鼠钙结合蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Drospirenone  中文名：屈螺酮  分子式：C24H30O3 

小鼠钙结合蛋白(CR)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Dasatinib  中文名：达沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S
组织PAK4激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  1,2-Bis(phenylthio)ethane  622-20-8  中文名：1,2-双(苯硫基)乙烷  分子式：C14H14S2  度：98.0%  关键词： 

组织PAK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  1,2-Cyclohexanedicarboximide  中文名：  分子式：O2  度：98.0%

组织PAK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene  34052-90-9  中文名：1,3-双(4,5-二氢-2-恶唑)苯  分子式：C12H12N2O2  度：98.0%   

组织P38β2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene  中文名：1,4-双(5-苯基-2-恶唑基)苯  分子式：C24H16N2O2  度：98.0%

组织P38a激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次  1,5,15-Tri-O-methylmorindol  942609-65-6  中文名：  分子式：C18H16O6  度：98.0%  关键词：  海巴戟; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
人肝内细胞现货供应S-2-Benzothiazolyl2-amino-alpha-(methoxyimino)-4-thiazolethiolacetate  中文名：AE活性酯  分子式：C13H10N4O2S3  度：98.0%  小鼠白介素 -13(p70) (mouse IL-13)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 Biosource  

Azathioprine  中文名：硫唑嘌呤  分子式：C9H7N7O2S  度：98.0%  小鼠癌胚抗原elisa试剂盒   小鼠癌胚抗原试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠癌胚抗原试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠癌胚抗原试剂盒、小鼠癌胚抗原elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

2-Benzothiazolol  中文名：2-羟基苯并噻唑  分子式：C7H5NOS  度：98.0%  超氧化物歧化酶测elisa试剂盒   超氧化物歧化酶测试剂盒   规格型号：96T/48T   超氧化物歧化酶测试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：超氧化物歧化酶测试剂盒、超氧化物歧化酶测elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

1,2-Benzanthraquinone  中文名：1,2-苯并奎宁酮  分子式：C18H10O2  度：98.0%  鹿红细胞膜蛋白elisa试剂盒   鹿红细胞膜蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   鹿红细胞膜蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鹿红细胞膜蛋白试剂盒、鹿红细胞膜蛋白试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

9-Anthracenecarboxylic acid  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2  度：98.0%  小鼠16α羟基雌elisa试剂盒   小鼠16α羟基雌试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠16α羟基雌试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠16α羟基雌试剂盒、小鼠16α羟基雌elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。