使用方法：
收到细胞人宫颈上皮永生化细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人宫颈上皮永生化细胞现货供应
简称：H8

种属：人

来源：宫颈；上皮细胞；永生化

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0492

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

5-Azacytidine  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5    碱性0酸酶（AKP）检测   Acid phosphatase (ACP) detection

5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  中文名：  分子式：C21H32O3    酸性0酸酶（ACP）检测   Prostate acid  enzyme (PACP) detection

5-Aminouracil  中文名：5-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2    酸性0酶（PACP）检测   Glamine syhetase (GS) detection              

5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水杨酸  分子式：C7H7NO3    胰蛋白酶1:250   250g

5-Aminoindole  中文名：5-氨基吲哚  分子式：C8H8N2    ypsin1:250,PorcinePancreas   25g
胸苷酸合成酶   英文名称：   thymidylate syhase   规格：   48T/96T   英文缩写：   TS  Pazufloxacin mesilate  163680-77-1  中文名：甲磺酸帕珠沙星  分子式：C17H19FN2O7S  度：98.0%  关键词： 

性激素结合球蛋白   英文名称：   Sex Hormone Binding Globulin   规格：   48T/96T   英文缩写：   SHBG  O-Benzyl-L-serine  中文名：O-苄基-L-丝氨酸  分子式：C10H13NO3  度：98.0%

型脂肪酸结合蛋白   英文名称：   Human hea Fatty Acid Binding Protein   规格：   48T/96T   英文缩写：   hFABP  n-Tritriacontan-16,18-dione  中文名：  分子式：C33H64O2  度：%

链球菌(ST)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T  Norfloxacin lactate  中文名：乳酸诺氟沙星  分子式：C19H24FN3O6  度：98.0%

新霉素   5g  Zidovudine  30516-87-1  中文名：齐多夫定  分子式：C10H13N5O4  度：98.0%  关键词：
Decoquinate  18507-89-6  中文名：癸氧喹酯  分子式：C24H35NO5    兔儿茶酚胺(CA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Quinocetone  81810-66-4  中文名：喹烯酮  分子式：C18H14N2O3    兔超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2    兔睾(rabbit TESTO)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Antipyrine  60-80-0  中文名：安替比林  分子式：C11H12N2O    兔抗酸性0酸酶5b(rabbit ACP-5b)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Tiamulin  55297-95-5  中文名：泰妙菌素  分子式：C28H47NO4S    兔调节蛋白(rabbit TM)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
人宫颈上皮永生化细胞现货供应乳酸（lacticacid）测定试剂盒（测血清、组织等）（比色法）  Rhein  478-43-3  中文名：大黄酸  分子式：C15H8O6  度：98.0%  关键词： 

肉毒杆菌(E/F型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T                 Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6 

肉毒杆菌(A/B型)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)   48T  Withaphysalin A  57423-72-0  中文名：  分子式：C28H34O6  度：98.0%  关键词： 

溶酶体相关膜蛋白3   英文名称：   Human Lysosomal Associated membrane protein 3   规格：   48T/96T   英文缩写：   LAMP3  3-Acetyl-2,5-dichlorothiophene  36157-40-1  中文名：  分子式：C6H4Cl2OS  度：98.0%  关键词： 

溶菌酶标准品   Standard for lysozyme                 Ranitidine   66357-59-3  中文名：盐酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。