基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 人滑膜成纤维细胞现货供应
简称：HFLS

种属：人

来源：滑膜；成纤维细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0553

使用方法：
收到细胞人滑膜成纤维细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

6-Benzyloxyindole  中文名：6-苄氧基吲哚  分子式：C15H13NO    NADP0酸酶（NADPase）测试盒   可见分光光度法   50管/48样

6-Aminouracil  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2    6-0酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）测试盒   紫外分光光度法   50管/48样           

6-Aminoquinoxaline  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3    乙酸铵 (醋酸铵)   100g

6-Aminopenicillanic acid  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S    AmmoniumAcetate   500g

6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基烟酸  分子式：C6H6N2O2    化铵   100g
内皮生长因子受体 1(VEGF-R1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  171422-85-8  中文名：  分子式：C56H90O19  度：98.0%  关键词：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

内皮生长因子D   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor D   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-D  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  168001-54-5  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.0%  关键词：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

内皮生长因子C   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor C   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-C  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19 

内皮生长因子A   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor A   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF-A  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.0%

内皮生长因子165   英文名称：   vascuiar endothelial growth factor 165   规格：   48T/96T   英文缩写：   VEGF165  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  168001-54-5  中文名：  分子式：C56H90O19
7α-Hydroxystigmasterol  中文名：7α-羟基豆甾醇  分子式：C29H48O2  度：%  兔半胱酸蛋白酶抑制剂C   英文名称：   Rabbit Cystatin C   规格：   48T/96T   英文缩写：   CSTC

Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C29H50O3  度：93.0%  兔基质金属蛋白酶-12(rabbit MMP-12)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sitosteryl palmitate  中文名：β-谷甾醇棕榈酸酯  分子式：C45H80O2  度：90.0%  兔基质金属蛋白酶-13(rabbit MMP-13)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

22-Dehydroclerosterol glucoside  中文名：  分子式：C35H56O6  度：%  兔基质金属蛋白酶-3(rabbit MMP-3)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

22-Dehydroclerosterol  中文名：22-去氢赤桐甾醇  分子式：C29H46O  度：94.0%  兔基质金属蛋白酶-9(rabbit MMP-9)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
人滑膜成纤维细胞现货供应山羊白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2  度：98.0%   

山羊白介素2(IL-2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2 

山羊白介素10elisa试剂盒   山羊白介素10试剂盒   规格型号：96T/48T   山羊白介素10试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：山羊白介素10试剂盒、山羊白介素10 elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid  中文名：  分子式：C12H12F2O4 

山羊白介素10(IL-10)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-Benzalphthalide  中文名：3-亚苄基苯酞  分子式：C15H10O2  度：98.0%

山羊白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              3-Benzoylthiazolidine-2-thione  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2