基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 人细胞直销
简称：KM12-SM

种属：人

来源：

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0295

使用方法：
收到细胞人细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

8-Hydroxyodoroside A  中文名：  分子式：C30H46O8    乙酰辅酶A羧化酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样

8-Hydroxyhyperforin 8,1-hemiacetal  中文名：  分子式：C35H52O5    淀粉含量测试盒   可见分光光度法   50管/48样

8-Hydroxy-7-iodo-5-quinolinesulfonic acid  中文名：喹方  分子式：C9H6INO4S    α-淀粉酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样

8-Bromo-7-(but-2-yn-1-yl)-3-methyl-1H-purine-2,6(3H,7H)-dione  中文名：  分子式：C10H9BrN4O2    β-淀粉酶测试盒   可见分光光度法   50管/24样           

8-Azaguanine  中文名：8-氮杂鸟嘌呤  分子式：C4H4N6O    乙酰丁香   100mg
血清铁检测   Copper blue protein (CP) detection  β-Anhydrouzarigenin  中文名：  分子式：C23H32O3 

血清铁蛋白   英文名称：   ferritin in serum   规格：   48T/96T   英文缩写：   SF  4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  52298-44-9  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S 

血清铁   英文名称：   Human serum Lron   规格：   48T/96T   英文缩写：   Lron  Paroxetine   中文名：盐酸帕罗西汀  分子式：C19H21ClFNO3  度：99.0%

血清（HDL）测试盒   HCV test kit  p-Anisoin  中文名：对茴香偶姻  分子式：C16H16O4 

血清淀粉样蛋白 (SAA)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Paris Saponin VII  中文名：重楼皂苷VII  分子式：C51H82O21  度：98.0%
Dehydroadynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H62O17  度：96.0%  兔血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

11,12-Di-O-acetyltenacigenin B  中文名：  分子式：C25H36O7  度：98.5%  兔结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tenacissoside I  中文名：通关藤苷I  分子式：C44H62O14  度：%  兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Stigmasta-4,25-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O  度：%  兔可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Stigmasta-4,22,25-trien-3-one  中文名：  分子式：C29H44O  度：%  兔可溶性P选择素（sP-selectin）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
人细胞直销神经胶质细胞衍化营养因子 (GDNF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Nitrendipine  39562-70-4  中文名：尼群地平  分子式：C18H20N2O6  度：98.0%  关键词： 

神经激肽 A(Neurokinin A)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Testosterone isocaproate  15262-86-9  中文名：异己酸睾酮  分子式：C25H38O3  度：98.0%  关键词： 

砷快速测定试剂盒   Arsenic rapid determination kit  Rebeprazole   117976-90-6  中文名：雷贝拉唑钠  分子式：C18H20N3NaO3S  度：98.0%  关键词： 

蛇毒因子(CVF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           4-Aminohippuric acid  中文名：4-氨基马尿酸  分子式：C9H10N2O3 

上腺髓质素(ADM)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  3-Hydroxychimaphilin  33253-99-5  中文名：3-羟基梅笠草素  分子式：C12H10O3  度：98.0%  关键词：  抗菌; ; 萘醌; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库