使用方法：
收到细胞人转基因细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人转基因细胞现货供应
简称：RKO-E6

种属：人

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE0142

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

9,16-Dioxo-10,12,14-octadecatrienoic acid  217810-46-3  中文名：  分子式：C18H26O4  度：%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠孕(mouse PROG)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

9,10-Bis(3,5-dihydroxyphenyl)anthracene  153715-08-3  中文名：9,10-双(3,5-二羟苯基)蒽  分子式：C26H18O4  度：98.0%  关键词：    小鼠可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O  度：98.0%  关键词：    小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2  度：98.0%  关键词：    小鼠颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

8-Hydroxyodoroside A  176519-75-8  中文名：  分子式：C30H46O8  度：96.0%  关键词：  夹竹桃; 强心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠骨胶原交联elisa试剂盒   小鼠骨胶原交联试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠骨胶原交联试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠骨胶原交联试剂盒、小鼠骨胶原交联eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Cefquinome  中文名：头孢喹咪  分子式：C23H24N6O5S2  度：98.0%

小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Deoxycholic acid  中文名：去氧胆酸  分子式：C24H40O4  度：98.5%

小鼠骨胶原交联(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Coumarin 7  中文名：香豆素 7  分子式：C20H19N3O2 

小鼠骨碱性0酸酶（BALP）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Deoxycholic acid  中文名：去氧胆酸  分子式：C24H40O4 

小鼠骨钙素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Deoxycholic acid  83-44-3  中文名：去氧胆酸  分子式：C24H40O4  度：98.5%  关键词：  胆烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
Dregeoside Aa1  20230-41-5  中文名：  分子式：C49H78O17    兔子基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Tigogenin  77-60-1  中文名：剑麻皂素  分子式：C27H44O3    Human thymidine phosphorylase (TP) ELISA Kit 人胸腺嘧啶核苷0酸化酶(TP)ELISA试剂盒

Adynerigenin β-neritrioside  88721-09-9  中文名：  分子式：C42H64O17    HumanAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 人抗核膜糖蛋白210抗体(gp210)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Tenacissoside G  191729-43-8  中文名：通关藤苷G  分子式：C42H64O14    Humaneosinophilcationicprotein,ECPELISA试剂盒人嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Dehydroadynerigenin β-neritrioside  143212-60-6  中文名：  分子式：C42H62O17    组织PKCι激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
人转基因细胞现货供应中文名：枸橼酸  分子式：C28H38N6O11S    HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB，PDGF-ABELISAKit人血血小板衍生生长因子AB(PDGF-AB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Amlexanox  68302-57-8  中文名：氨来呫诺  分子式：C16H14N2O4    兔子主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Losartan  114798-26-4  中文名：氯沙坦  分子式：C22H23ClN6O    Human cyclin D1 (Cyclin-D1) ELISA Kit 人细胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA试剂盒

Glyburide  10238-21-8  中文名：格列本脲  分子式：C23H28ClN3O5S    Humanmitoticspindleapparatusaibody,MSAELISAKit 人抗纺锤体抗体(MSA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Rosiglitazone  122320-73-4  中文名：罗格列酮  分子式：C18H19N3O3S    Humancytokeratin17,CK-17ELISA试剂盒人细胞角蛋白17(CK17)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。