使用方法：
收到细胞人巨细胞细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人巨细胞细胞特价
简称：PG

种属：人

来源：巨细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01444

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Allyl cinnamate  1866-31-5  中文名：肉桂酸烯丙酯  分子式：C12H12O2  度：98.0%  关键词：    小鼠干扰素-α   英文名称：   Ierferon α   规格：   48T/96T   英文缩写：   IFN-α

Allopurinol  315-30-0  中文名：别嘌醇  分子式：C5H4N4O  度：98.0%  关键词：    小鼠干扰素-β   英文名称：   Ierferon β   规格：   48T/96T   英文缩写：   IFN-β

Allitol  488-44-8  中文名：蒜糖醇  分子式：C6H14O6  度：%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠干扰素-γ   英文名称：   Ierferon γ   规格：   48T/96T   英文缩写：   IFN-γ

Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯达唑  分子式：C12H15N3O2S  度：98.5%  关键词：    小鼠可溶性细胞间粘附分子 -1 (mouse sICAM-1)   作用：   ELISA   规格：   96T   美国 R&D

Agomelatine  138112-76-2  中文名：阿戈美拉汀  分子式：C15H17NO2  度：98.0%  关键词：    小鼠干扰素 - a (mouse IFN- a )   作用：   ELISA   规格：   72T   美国 R&D
小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体elisa试剂盒   小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体试剂盒、小鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Diaveridine  中文名：敌菌净  分子式：C13H16N4O2 

小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Dexmedetomidine   145108-58-3  中文名：盐酸右美托咪定  分子式：C13H17ClN2 

小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体elisa试剂盒   小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体试剂盒、小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Diaveridine  5355-16-8  中文名：敌菌净  分子式：C13H16N4O2  度：98.0%   

小鼠过氧化物酶体增殖物活化受体γ   英文名称：   Mouse Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ   规格：   48T/96T   英文缩写：   PPARγ  N-Acetyl-L-tryptophan  1218-34-4  中文名：N-乙酰-L-色氨酸  分子式：C13H14N2O3 

小鼠过敏elisa试剂盒   小鼠过敏试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠过敏试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠过敏试剂盒、小鼠过敏eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Dihydroisotanshinone II  260397-58-8  中文名：  分子式：C18H14O3
8,14-Epoxyergosta-4,22-diene-3,6-dione  1265908-20-0  中文名：  分子式：C28H40O3    兔子碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Schleicheol 1  256445-66-6  中文名：  分子式：C30H52O2    Human thymus leukemia aigen (TLa) ELISA Kit 人胸腺抗原(TLa)ELISA试剂盒

Uzarigenin digitaloside  61217-80-9  中文名：  分子式：C30H46O8    Humanpunjecellaoaibody,PCA-1/YoELISAKit 人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Daturametelin I  904667-65-8  中文名：  分子式：C34H48O10    humanEndothelin1,ET-1ELISA试剂盒人内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T

6-O-Methylcerevisterol  126060-09-1  中文名：  分子式：C29H48O3    组织PKCδ激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次
人巨细胞细胞特价Solvent Yellow 3  97-56-3  中文名：溶剂黄  分子式：C14H15N3  度：99.0%  关键词：    小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Solanesol  13190-97-1  中文名：茄尼醇  分子式：C45H74O  度：%  关键词：  抗氧化; 抗菌; 烟草; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠c-fosELISAKit   ELISA.   96T/48T           

 prasterone sulfate  1099-87-2  中文名：去氢表雄酮硫酸钠盐  分子式：C19H27NaO5S  度：98.0%  关键词：    小鼠氧化型(ox-HDL）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

 cholate  361-09-1  中文名：胆酸钠  分子式：C24H39NaO5  度：98.5%  关键词：  胆烷; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠氧化型（ox-LDL）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Sitosteryl palmitate  2308-85-2  中文名：β-谷甾醇棕榈酸酯  分子式：C45H80O2  度：90.0%  关键词：  豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠氧化抗体(OLAb)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。