使用方法：
收到细胞人直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人直销
简称：U-138MG

种属：人

来源：星形细胞瘤；男性

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0569

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Bendamustine   3543-75-7  中文名：盐酸苯达莫司汀  分子式：C16H22Cl3N3O2  度：98.0%  关键词：    小鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Benazepril   86541-74-4  中文名：盐酸贝那普利  分子式：C24H29ClN2O5  度：98.0%  关键词：    小鼠硫氧还蛋白还原酶(xR)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Benactyzine   57-37-4  中文名：盐酸贝那替嗪  分子式：C20H26ClNO3  度：98.0%  关键词：    小鼠硫氧化还原蛋白(x)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Bathophenanthroline  1662-01-7  中文名：红菲绕啉  分子式：C24H16N2  度：98.0%  关键词：    小鼠抗体（EHF-Ab）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Baclofen  1134-47-0  中文名：巴氯芬  分子式：C10H12ClNO2  度：98.0%  关键词：    小鼠0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠活化素A(Activin-A)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2  度：99.0%   

小鼠活化蛋白elisa试剂盒   小鼠活化蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠活化蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠活化蛋白试剂盒、小鼠活化蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Dinitolmide  148-01-6  中文名：二硝托胺  分子式：C8H7N3O5 

小鼠活化蛋白C(APC)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2 

小鼠活化蛋白C(APC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate  中文名：  分子式：C10H12O4 

小鼠黄体生成素释放激素(LHRH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S  度：98.0%  关键词：
Desglucohellebrin  20300-44-1  中文名：  分子式：C30H42O10    Humanai-deoxyribonucleaseB,ai-DNaseBELISAKit 人抗DNA酶B抗体(ai-DNaseB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Polypodine B  18069-14-2  中文名：水龙骨甾酮B  分子式：C27H44O8    humanEchoVirusIgM,ECHOIgMELISA试剂盒人艾柯病毒IgM(ECHOIgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  1323952-04-0  中文名：  分子式：C30H44O10    组织PDGFRα激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

Withanolide S  63139-16-2  中文名：醉茄内酯S  分子式：C28H40O8    HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit人肽基脯氨酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Ergosterol glucoside  130155-33-8  中文名：麦角甾醇葡萄糖苷  分子式：C34H54O6    兔子可溶性细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人直销Stigmastane-3,6-diol  中文名：  分子式：C29H52O2    载脂蛋白   英文名称：   Apolipoprotein   英文缩写：   AI   规格：   48T/96T

Stigmasta-5,8-dien-3-ol  中文名：  分子式：C29H48O    抗Livin 抗体   英文名称：   Ailivin aibody   英文缩写：   ALA   规格：   48T/96T

Stigmasta-4,25-dien-3-one  中文名：  分子式：C29H46O    直链淀粉   250mg

Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  中文名：  分子式：C29H48O2    Amylose,fromPotato   1g

Stigmasta-4,22-dien-3-one  中文名：豆甾-4,22-二烯-3-酮  分子式：C29H46O    抗蛋白酶   250mg

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。