公司产品仅用于科研
中文名称： 人胚现货供应
简称：HFL1

种属：人

来源：胚胎；肺；成纤维细胞；男性

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0034
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞人胚现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
Benzyl carbamate  621-84-1  中文名：氨基甲酸苄酯  分子式：C8H9NO2  度：98.0%      小鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Benzyl 4-hydroxybenzoate  94-18-8  中文名：4-羟基苯甲酸苄酯  分子式：C14H12O3  度：98.0%      小鼠脑啡肽（ENK）ELISA试剂盒   96T   试剂盒   组装/原装        

Benzyl 4-bromophenyl ketone  2001-29-8  中文名：苄基4-溴代苯基酮  分子式：C14H11BrO  度：98.0%      小鼠末端补体复合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate  1738-76-7  中文名：  分子式：C16H19NO5S  度：98.0%  关键词：    小鼠内皮细胞生长因子受体-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone  3669-41-8  中文名：2,4-二羟基苯基苄酮  分子式：C14H12O3  度：98.0%      小鼠补体蛋白4(C4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
小鼠基质金属蛋白酶-2   英文名称：   maix metalloproteinase 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   MMP-2  Diphenhydramine   中文名：盐酸苯海拉明  分子式：C17H22ClNO  度：98.0%

小鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           DL-2-Amino-n-octanoic acid  644-90-6  中文名：DL-2-氨基正辛酸  分子式：C8H17NO2 

小鼠基质金属蛋白酶-1(mouse MMP-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Dioxopromethazine   中文名：盐酸二氧丙嗪  分子式：C17H21ClN2O2S  度：99.0%

小鼠基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Diosgenin  中文名：薯蓣皂苷元  分子式：C27H42O3  度：98.0%

小鼠基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Candesartan  中文名：坎地沙坦  分子式：C24H20N6O3
Jacaranone  60263-07-2  中文名：  分子式：C9H10O4    Rat platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒

3-Hydroxychimaphilin  33253-99-5  中文名：3-羟基梅笠草素  分子式：C12H10O3    Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Chimaphilin  482-70-2  中文名：梅笠草素  分子式：C12H10O2    HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISA试剂盒人泛素结合酶(E2/UBCE)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Prerubialatin  1667718-89-9  中文名：  分子式：C27H20O7    组织PAK2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

(S)-4-Methoxydalbergione  2543-95-5  中文名：(S)-4-甲氧基黄檀醌  分子式：C16H14O3    Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人胚现货供应Sulfadiazine  68-35-9  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S    兔坏死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12    兔干细胞因子(rabbit SCF)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Dyphylline  479-18-5  中文名：二羟丙茶碱  分子式：C10H14N4O4    兔转化生长因子-a(rabbit TGF-a)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S    兔转化生长因子-β1(rabbit TGF-b1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Lomefloxacin   98079-52-8  中文名：盐酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3    兔转化生长因子-b2(rabbit TGF-b2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。