使用方法：
收到细胞人乳腺鳞状癌细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人乳腺鳞状癌细胞直销
简称：HCC1806

种属：人

来源：乳腺鳞癌；女性

培养基：1640

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01056

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Clotrimazole  23593-75-1  中文名：克霉唑  分子式：C22H17ClN2  度：98.0%  关键词：    小鼠葡萄糖激酶(GCK)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Clorofene  120-32-1  中文名：4-氯-2-苄基苯酚  分子式：C13H11ClO  度：98.0%      小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Clopidogrel bisulfate  135046-48-9  中文名：硫酸氢氯吡格雷  分子式：C16H18ClNO6S2  度：98.0%  关键词：    小鼠皮质/上腺(CO)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Clevidipine butyrate  167221-71-8  中文名：丁酸氯维地平  分子式：C21H23Cl2NO6  度：98.0%  关键词：    小鼠破骨细胞分化因子(ODF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Clerosterol glucoside  123621-00-1  中文名：赤桐甾醇葡萄糖苷  分子式：C35H58O6  度：93.0%  关键词：  豆甾烷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISAkit   ELISA.   96T/48T
小鼠胶原酶IIelisa试剂盒   小鼠胶原酶II试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胶原酶II试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胶原酶II试剂盒、小鼠胶原酶IIeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Desglucohellebrin  20300-44-1  中文名：  分子式：C30H42O10  度：98.0%  关键词：  强心; 强心苷; 甾苷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Drevogenin A  10163-83-4  中文名：  分子式：C28H42O7 

小鼠胶原酶II(CollagenaseII)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Falcarinol  21852-80-2  中文名：  分子式：C17H24O  度：%  关键词： 

小鼠胶原酶Ielisa试剂盒   小鼠胶原酶I试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠胶原酶I试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠胶原酶I试剂盒、小鼠胶原酶Ieisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Desglucohellebrin  中文名：  分子式：C30H42O10 

小鼠胶原酶I(CollagenaseI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Falcarinol  21852-80-2  中文名：  分子式：C17H24O
Cerebroside B  88642-46-0  中文名：脑苷酯B  分子式：C41H77NO9    兔子素E1(PGE1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

4-Oxododecanedioic acid  30828-09-2  中文名：  分子式：C12H20O5    Human adenovirus IgG (ADV-IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG(ADV-IgG)ELISA试剂盒

Rengynic acid  517883-38-4  中文名：  分子式：C8H14O4    HumanKidneyinjurymolecule1,Kim-1ELISAKit 人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Epirengynic acid  1310146-00-9  中文名：  分子式：C8H14O4    HumanDihydrotestosterone,DHTELISA试剂盒人双氢睾同(DHT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

4-Hydroxy-4-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone  81053-14-7  中文名：  分子式：C9H14O4    组织NADPH细胞色素C还原酶(NADPHCytochromeCReductase)活性比色法定量检测试剂盒20次
人乳腺鳞状癌细胞直销Tenacigenin B  中文名：  分子式：C21H32O5  度：%  兔内啡肽-b(rabbit Endorphin-b)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Uzarigenin  中文名：  分子式：C23H34O4  度：97.5%  兔雌二醇(rabbi E2)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Odoroside H  中文名：  分子式：C30H46O8  度：98.5%  兔上腺素(rabbit EPI)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  

Neridienone B  中文名：  分子式：C21H28O4  度：95.0%  兔内皮型合成酶elisa试剂盒   兔内皮型合成酶试剂盒   规格型号：96T/48T   兔内皮型合成酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔内皮型合成酶试剂盒、兔内皮型合成酶elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Neritaloside  中文名：  分子式：C32H48O10  度：97.5%  兔基质金属蛋白酶1elisa试剂盒   兔基质金属蛋白酶1试剂盒   规格型号：96T/48T   兔基质金属蛋白酶1试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔基质金属蛋白酶1试剂盒、兔基质金属蛋白酶1elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。