使用方法：
收到细胞人食管腺癌细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人食管腺癌细胞直销
简称：BIC-1

种属：人

来源：食管腺癌；男性

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0935

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Diosgenin  512-04-9  中文名：薯蓣皂苷元  分子式：C27H42O3  度：98.0%  关键词：  ; 雌激素剂; 黄山药; 螺甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠17羟孕(17-OHP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Dioscin  19057-60-4  中文名：薯蓣皂苷  分子式：C45H72O16  度：98.5%  关键词：  溶血; 细胞毒; ; 薯蓣属; 螺甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠乳酸脱氢酶   英文名称：   Mouse Lactate Dehydrogenase   规格：   48T/96T   英文缩写：   LDH

Dinitolmide  148-01-6  中文名：二硝托胺  分子式：C8H7N3O5  度：98.0%      小鼠白三烯C4   英文名称：   Mouse Leukoiene C4   规格：   48T/96T   英文缩写：   LTC4

Dimetridazole  551-92-8  中文名：二甲硝咪唑  分子式：C4H5N3O2  度：99.0%      小鼠脂蛋白酯酶   英文名称：   Mouse Lipopeinlipase   规格：   48T/96T   英文缩写：   LPL

Dimethylolurea  140-95-4  中文名：双羟甲脲  分子式：C3H8N2O3  度：98.0%      小鼠白三烯   英文名称：   Mouse leukoiene   规格：   48T/96T   英文缩写：   LT3
小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Nandrolone undecylate  862-89-5  中文名：十一酸诺龙  分子式：C29H46O3  度：98.0%  关键词： 

小鼠抗单链DNA抗体/变性DNA抗体(ssDNA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Epirengynic acid  中文名：  分子式：C8H14O4  度：98.0%

小鼠抗单核细胞抗体elisa试剂盒   小鼠抗单核细胞抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠抗单核细胞抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠抗单核细胞抗体试剂盒、小鼠抗单核细胞抗体eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Epigoitrin  中文名：表告依春  分子式：C5H7NOS  度：98.5%

小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Epiandrosterone  中文名：表雄酮  分子式：C19H30O2  度：98.0%

小鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Estradiol  50-28-2  中文名：雌二醇  分子式：C18H24O2
Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名：绿原酸甲酯  分子式：C17H20O9    HumanHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 人热休克蛋白60(Hsp-60)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

3,6'-Disinapoylsucrose  139891-98-8  中文名：3,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19    Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISA试剂盒人抗脱氧核糖核蛋白抗体(DNP-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Triethyl   77-93-0  中文名：柠檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7    组织LYNA激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

α-Lipoic acid  1077-28-7  中文名：α-硫辛酸  分子式：C8H14O2S2    Humanplaceagrowthfactor，PLGFELISAKit人胎盘生长因子(PLGF)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Polyhydroxybutyrate  26744-04-7  中文名：聚羟基丁酸酯  分子式：C12H20O7    兔子髓0脂碱性蛋白(MBP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人食管腺癌细胞直销Tetrahydrolachnophyllum lactone  56407-87-5  中文名：  分子式：C10H14O2  度：90.0%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S  度：98.0%  关键词：    小鼠抑制素B(INH-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tetracycline  60-54-8  中文名：四环素  分子式：C22H24N2O8  度：97.0%      小鼠促甲状腺素释放激素(H)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tetracaine   136-47-0  中文名：盐酸丁卡因  分子式：C15H25ClN2O2  度：98.0%  关键词：    小鼠促上皮质激素释放激素(CRH)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Tetracaine  94-24-6  中文名：丁卡因  分子式：C15H24N2O2  度：98.0%  关键词：    小鼠胰岛素受体β(ISR-β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。