使用方法：
收到细胞人小细胞细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人小细胞细胞现货供应
简称：NCI-H2227

种属：人

来源：小细胞；男性

培养基：L15

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0953

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Emtricitabine  中文名：恩曲他滨  分子式：C8H10FN3O3S    猪(HYD)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Empagliflozin  中文名：依帕列净  分子式：C23H27ClO7    猪前列环素（PGI2）Elisa试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Emodin  中文名：大黄素  分子式：C15H10O5    猪葡萄糖转运蛋白2(GL2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Eleutheroside C  中文名：  分子式：C8H16O6    猪热休克蛋白40(HSP-40)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Edaravone  中文名：依达拉奉  分子式：C10H10N2O    猪热休克蛋白20(HSP-20)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
中文名称   方法   规格  Alogliptin  中文名：阿格列汀  分子式：C18H21N5O2  度：98.0%

中文名称   方法   规格  3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8  度：98.0%

中文名称   方法   规格  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-苄基-2-(二甲基氨基)-4'-吗啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2 

中文名称   方法   规格              Naftifine   65473-14-5  中文名：盐酸萘替芬  分子式：C21H22ClN 

中文名称   方法   规格              N,N'-Bis(2-hydroxyethyl)oxamide  1871-89-2  中文名：N,N'-双(2-羟乙基)草酰胺  分子式：C6H12N2O4
6,6'-Di-O-sinapoylsucrose  中文名：6,6'- 二芥子酰基蔗糖  分子式：C34H42O19  度：97.0%  兔子球蛋白E(IgE)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

1,2,3,6-Tetra-O-galloyl-β-D-glucose  中文名：1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖  分子式：C34H28O22  度：98.0%  兔子球蛋白A(IgA)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Pentagalloylglucose  中文名：五没食子酰葡萄糖  分子式：C41H32O26  度：98.0%  兔子球蛋白Gelisa试剂盒   兔子球蛋白G试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子球蛋白G试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子球蛋白G试剂盒、兔子球蛋白G elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Creoside III  中文名：  分子式：C18H24O9  度：98.0%  兔子球蛋白Eelisa试剂盒   兔子球蛋白E试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子球蛋白E试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子球蛋白E试剂盒、兔子球蛋白E elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Ethyl β-D-xylopyranoside  中文名：  分子式：C7H14O5  度：97.5%  兔子球蛋白Aelisa试剂盒   兔子球蛋白A试剂盒   规格型号：96T/48T   兔子球蛋白A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：兔子球蛋白A试剂盒、兔子球蛋白A elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
人小细胞细胞现货供应兔损伤分子-1(rabbit Kim-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名：5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-N(4)-苯甲酰基-2'-脱氧胞苷  分子式：C37H35N3O7 

兔素(Renin)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名：D-谷氨酸5-苯甲酯  分子式：C12H15NO4  度：98.0%   

兔素(Renin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%   

兔素(rabbit Renin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  4-Aminosalicylic acid  中文名：4-氨基水杨酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  5-Hydroxymethylfurfural  中文名：5-羟甲基糠醛  分子式：C6H6O3  度：%

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。