使用方法：
收到细胞人正常细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人正常细胞直销
简称：NOK

种属：人

来源：

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01392

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Gliquidone  33342-05-1  中文名：格列喹酮  分子式：C27H33N3O6S  度：98.0%  关键词：    豚鼠基质金属蛋白酶9elisa试剂盒   豚鼠基质金属蛋白酶9试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠基质金属蛋白酶9试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠基质金属蛋白酶9试剂盒、豚鼠基质金属蛋白酶9eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Glimepiride  93479-97-1  中文名：格列美脲  分子式：C24H34N4O5S  度：98.0%  关键词：    小鼠酸性粒细胞趋化因子elisa试剂盒   小鼠酸性粒细胞趋化因子试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠酸性粒细胞趋化因子试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠酸性粒细胞趋化因子试剂盒、小鼠酸性粒细胞趋化因子eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Gliclazide  21187-98-4  中文名：格列齐特  分子式：C15H21N3O3S  度：98.0%  关键词：    小鼠小扁结合型甲胎蛋白elisa试剂盒   小鼠小扁结合型甲胎蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠小扁结合型甲胎蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠小扁结合型甲胎蛋白试剂盒、小鼠小扁结合型甲胎蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Glaucogenin C mono-D-thevetoside  849201-84-9  中文名：  分子式：C28H40O9  度：98.0%  关键词：    小鼠表皮调节素elisa试剂盒   小鼠表皮调节素试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠表皮调节素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠表皮调节素试剂盒、小鼠表皮调节素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Ginsenoyne K  141947-42-4  中文名：  分子式：C17H24O3  度：%  关键词：    豚鼠神经肽Aelisa试剂盒   豚鼠神经肽A试剂盒   规格型号：96T/48T   豚鼠神经肽A试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：豚鼠神经肽A试剂盒、豚鼠神经肽Aeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-2   英文名称：   insulin-like growth factors binding protein-2   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGFBP-2  Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate  24922-02-9  中文名：  分子式：C8H12O3  度：98.0%  关键词： 

小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-1(mouse IGFBP-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Ethyl 5-amino-4-cyano-3-(2-ethoxy-2-oxoethyl)thiophene-2-carboxylate  中文名：  分子式：C12H14N2O4S  度：98.0%

小鼠类胰岛素生长因子结合蛋白-1   英文名称：   insulin-like growth factors binding protein-1   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGFBP-1  Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate  中文名：  分子式：C8H12O3 

小鼠类胰岛素生长因子-2   英文名称：   Insulin like Growth Factor 1 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   IGF-2  Ethyl 3-cyclopropyl-3-oxopropanoate  中文名：  分子式：C8H12O3  度：98.0%

小鼠类胰岛素生长因子-1(mouse IGF-1)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装     D-arabinitol  中文名：  分子式：C5H12O5
Stavudine  3056-17-5  中文名：司他夫定  分子式：C10H12N2O4    HumanAi-SomaticMuscleAibody,ASAELISAKit 人抗骨骼肌抗体(ASA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Albendazole  54965-21-8  中文名：阿苯达唑  分子式：C12H15N3O2S    Humancytokeratin20,CK-20ELISA试剂盒人细胞角蛋白20(CK-20)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine  175291-56-2  中文名：Fmoc-苏氨酸磷酸苄酯  分子式：C26H26NO8P    组织HSV(HERPESSIMPLX)病毒定性检测试剂盒20次

8-Phenyloctanol  10472-97-6  中文名：8-苯基辛醇  分子式：C14H22O    HumanPlateletFactor4,PF-4ELISAKit人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

8-Phenyloctanoic acid  26547-51-3  中文名：8-苯基辛酸  分子式：C14H20O2    兔子脂联素(ADP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人正常细胞直销Trimethoprim  中文名：甲氧苄啶  分子式：C14H18N4O3    鱼类皮质醇(Coisol)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Trillin  中文名：延龄草苷  分子式：C33H52O8    鱼类甲状腺素(T4)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Triethyl   中文名：柠檬酸三乙酯  分子式：C12H20O7    鱼类超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Tricetyl fingolimod  中文名：  分子式：C25H39NO5    鱼糖胺聚糖(GAG)ELISA检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Triamcinolone acetonide  中文名：曲安奈德  分子式：C24H31FO6    鱼尿苷二0酸葡萄糖酸转移酶（UDPGT）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。