使用方法：
收到细胞人正常主气管上皮细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人正常主气管上皮细胞现货供应
简称：HNTEC

种属：人

来源：主气管；上皮细胞

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE01540

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Iloperidone  中文名：伊潘立酮  分子式：C24H27FN2O4    猪肝细胞生长因子(HGF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Ilaprazole  中文名：艾普拉唑  分子式：C19H18N4O2S    猪红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Ikshusterol 3-O-glucoside  中文名：  分子式：C35H60O7    猪转移表面黏附分子(MMSAM)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Hypocrellin A  中文名：竹红菌甲素  分子式：C30H26O10    猪核转录因子kb-p65(NF-kBp65)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Hydroxyprogesterone acetate  中文名：醋酸羟孕酮  分子式：C23H32O4    猪核因子κB抑制蛋白α（IKB-α）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
猪白细胞介素15elisa试剂盒   猪白细胞介素15试剂盒   规格型号：96T/48T   猪白细胞介素15试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：猪白细胞介素15试剂盒、猪白细胞介素15eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Tegafur  17902-23-7  中文名：替加氟  分子式：C8H9FN2O3 

猪白细胞间介素8   英文名称：   Porcine Ierleukin 8   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-8  Temozolomide  中文名：替莫唑胺  分子式：C6H6N6O2  度：99.0%

猪白细胞间介素2   英文名称：   Porcine Ierleukin 2   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-2  Tenacigenin B  80508-42-5  中文名：  分子式：C21H32O5 

猪白细胞间介素1β   英文名称：   Porcine Ierleukin 1β   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-1β  Tenacigenin B  中文名：  分子式：C21H32O5 

猪白细胞间介素10   英文名称：   Porcine Ierleukin 10   规格：   48T/96T   英文缩写：   IL-10  Tenacigenin B  中文名：  分子式：C21H32O5  度：%
3-Quinuclidinone  中文名：3-奎宁环酮  分子式：C7H11NO  度：98.0%  兔子中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

6-Amino-1-methyluracil  中文名：  分子式：C5H7N3O2  度：98.0%  兔子脂联素(ADP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Gimeracil  中文名：吉莫斯特  分子式：C5H4ClNO2  度：98.0%  兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Amlexanox ethyl ester  中文名：  分子式：C18H18N2O4  度：98.0%  兔子孕激素/孕(PROG)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

1,2-Cyclohexanedicarboximide  中文名：  分子式：O2  度：98.0%  兔子脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人正常主气管上皮细胞现货供应兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名：  分子式：C8H8OS2 

兔子TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S 

兔子S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基烟酸  分子式：C6H6N2O2  度：98.0%

兔子S100蛋白(S-100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Aminoindole  5318-27-4  中文名：6-氨基吲哚  分子式：C8H8N2 

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基烟酸  分子式：C6H6N2O2

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。