使用方法：
收到细胞人主动脉平滑肌细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 人主动脉平滑肌细胞直销
简称：HASMC(Aorta)

种属：人

来源：主动脉平滑肌

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0490

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天门冬氨酸  分子式：C4H7NO4  度：98.0%  关键词    小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

L-Ascorbic acid  50-81-7  中文名：L-抗坏血酸  分子式：C6H8O6  度：98.0%  关键词：    小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Lapatinib  231277-92-2  中文名：拉帕替尼  分子式：C29H26ClFN4O4S  度：98.0%  关键词：    小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Lapachol  84-79-7  中文名：拉帕醇  分子式：  度：98.0%  关键词：  ; 抗菌; ; 萘醌; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Lansoprazole  103577-45-3  中文名：兰索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S  度：98.0%  关键词：    小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装
小鼠细胞表面抗原分子8   英文名称：   Mouse Cluster Of Differeiation 8   规格：   48T/96T   英文缩写：   CD8+  Fenbendazole  中文名：芬苯达唑  分子式：C15H13N3O2S 

小鼠球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Fenticonazole nitrate  73151-29-8  中文名：硝酸芬替康唑  分子式：C24H21Cl2N3O4S  度：98.0%  关键词： 

小鼠球蛋白G(IgG)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Fenticonazole nitrate  73151-29-8  中文名：硝酸芬替康唑  分子式：C24H21Cl2N3O4S 

小鼠球蛋白elisa试剂盒   小鼠球蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠球蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠球蛋白试剂盒、小鼠球蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。     Fingolimod   162359-56-0  中文名：盐酸芬戈莫德  分子式：C19H34ClNO2 

小鼠球蛋白D   英文名称：   Mouse Immunoglobulin D   规格：   48T/96T   英文缩写：   IgD  Fenazox  中文名：氨芬酸钠  分子式：C15H14NNaO4  度：98.0%
2-Amino-4'-fluorobenzophenone  3800/6/4  中文名：  分子式：C13H10FNO    HumanPodocalyxin,PCXELISAKit人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Enalapril maleate  76095-16-4  中文名：马来酸依那普利  分子式：C24H32N2O9    兔子组织因子(TF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Pioglitazone   112529-15-4  中文名：盐酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S    Rat vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 大鼠内皮细胞生长因子C(VEGF-C)ELISA试剂盒

Amlodipine besylate  111470-99-6  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S    humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 人0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Sulfamethoxazole  723-46-6  中文名：磺胺甲噁唑  分子式：C10H11N3O3S    HumanCysticercosisaybody,CYTAbELISA试剂盒人囊虫病抗体(CYTAb)ELISA试剂盒规格：96T/48T
人主动脉平滑肌细胞直销Venlafaxine  93413-69-5  中文名：文拉法辛  分子式：C17H27NO2    Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA试剂盒

Venlafaxine   99300-78-4  中文名：盐酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2    rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 兔子纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Ondansetron  99614-02-5  中文名：昂丹司琼  分子式：C18H19N3O    CLIAKitforATF-1(Humanactivatinganscriptionfactor-1)ELISAKit人转录因子抗体-1规格：48T/96T

Ondansetron   99614-01-4  中文名：盐酸昂丹司琼  分子式：C18H20ClN3O    线粒体复合物I蛋白共沉淀分析试剂盒5次

Bupivacaine   18010-40-7  中文名：盐酸布比卡因  分子式：C18H29ClN2O    Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit兔血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格：96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。