使用方法：
收到细胞正常人表皮角质形成细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 正常人表皮角质形成细胞特价
简称：NHEK

种属：人

来源：表皮；角质形成层

培养基：DMEM

状态：贴壁

产品规格：

单位：

货号：AE0659

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Lomefloxacin   98079-52-8  中文名：盐酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3  度：98.0%      小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体elisa试剂盒   小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体试剂盒、小鼠髓过氧化物酶特异性抗中性粒细胞胞质抗体elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Lithocholic acid  434-13-9  中文名：石胆酸  分子式：C24H40O3  度：98.5%  关键词：  胆烷; 对照品; 标准品; 天然产物; 天然产物库  小鼠天冬酸基转移酶elisa试剂盒   小鼠天冬酸基转移酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠天冬酸基转移酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠天冬酸基转移酶试剂盒、小鼠天冬酸基转移酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Linderaspirone A  1235126-46-1  中文名：  分子式：C34H32O10  度：98.5%  关键词：  植物提取物; 天然产物; 天然产物库  小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白elisa试剂盒   小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白试剂盒、小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Lincomycin   859-18-7  中文名：盐酸林可霉素  分子式：C18H35ClN2O6S  度：98.0%  关键词：    小鼠正常T细胞表达elisa试剂盒   小鼠正常T细胞表达试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠正常T细胞表达试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠正常T细胞表达试剂盒、小鼠正常T细胞表达eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Lincomycin  154-21-2  中文名：林可霉素  分子式：C18H34N2O6S  度：98.0%      小鼠脂蛋白相关0脂酶elisa试剂盒   小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠脂蛋白相关0脂酶试剂盒、小鼠脂蛋白相关0脂酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。
小鼠脑脊髓炎病毒（TMEV）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Ficaprenol 11  中文名：  分子式：C55H90O 

小鼠脑红蛋白elisa试剂盒   小鼠脑红蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠脑红蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠脑红蛋白试剂盒、小鼠脑红蛋白elisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Fingolimod   中文名：盐酸芬戈莫德  分子式：C19H34ClNO2 

小鼠脑红蛋白(NGB)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O  度：%  关键词：  中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

小鼠脑红蛋白(NGB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tetraethyl ranelate  58194-26-6  中文名：  分子式：C20H26N2O8S 

小鼠脑啡肽（ENK）ELISA试剂盒   96T   试剂盒   组装/原装           Ficaprenol 11  26296-50-4  中文名：  分子式：C55H90O
Benzenesulfonic acid  1998/11/3  中文名：苯磺酸  分子式：C6H6O3S    Rabbitmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAkit 兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Amlodipine  88150-42-9  中文名：氨氯地平  分子式：C20H25ClN2O5    CLIAKitforBetaManase(HumanAlphamannosidase)ELISAKit人β甘露糖苷酶规格：48T/96T

Propranolol   318-98-9  中文名：盐酸普萘洛尔  分子式：C16H22ClNO2    细菌茁糖酵解溴百里酚蓝(BTB)琼脂平板50个

Propafenone   34183-22-7  中文名：盐酸普罗帕酮  分子式：C21H28ClNO3    RabbitDihydrotestosterone,DHTELISAKit兔双氢睾同(DHT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Procaine   1951/5/8  中文名：盐酸普鲁卡因  分子式：C13H21ClN2O2    豚鼠25羟基维生素D3(25 HVD3)ELISA试剂盒 ，英文名： 25 HVD3 ELISA Kit
正常人表皮角质形成细胞特价Vildagliptin  中文名：维达列汀  分子式：C17H25N3O2    鱼雌激素elisa试剂盒   鱼雌激素试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼雌激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鱼雌激素试剂盒、鱼雌激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

Vilazodone   中文名：盐酸维拉唑酮  分子式：C26H28ClN5O2    鱼雌二醇elisa试剂盒   鱼雌二醇试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼雌二醇试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：鱼雌二醇试剂盒、鱼雌二醇eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

vibo-Quercitol  中文名：  分子式：C6H12O5    氧化型谷胱甘肽elisa试剂盒   氧化型谷胱甘肽试剂盒   规格型号：96T/48T   氧化型谷胱甘肽试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：氧化型谷胱甘肽试剂盒、氧化型谷胱甘肽Eeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  

Venlafaxine   中文名：盐酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2    鱼促卵泡素   ELISA.   96T/48T

Venlafaxine  中文名：文拉法辛  分子式：C17H27NO2    鱼促黄体激素   ELISA.   96T/48T

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。