基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 牛肾细胞直销
简称：MDBK(NBL-1)

种属：牛

来源：肾；自发永生；雄性

培养基：EMEM

状态：贴壁

产品规格：1×106

单位：T25/瓶

货号：AE0007

使用方法：
收到细胞牛肾细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

Palmitone  502-73-8  中文名：棕榈酮  分子式：C31H62O  度：98.0%  关键词：    小鼠雄激素(androgen)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Oxytetracycline   2058-46-0  中文名：盐酸土霉素  分子式：C22H25ClN2O9  度：98.0%      小鼠性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

Oxymetholone  434-07-1  中文名：康复龙  分子式：C21H32O3  度：98.0%  关键词：    小鼠信号转导分子7(Smad7)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装        

Oxiracetam  62613-82-5  中文名：奥拉西坦  分子式：C6H10N2O3  度：98.0%  关键词：    小鼠胸腺活化调节趋化因子(mouse TARC)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装

Oxandrolone  53-39-4  中文名：氧甲氢龙  分子式：C19H30O3  度：98.0%  关键词：    小鼠凝血酶抗凝血酶复合物(mouse TAT)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装
小鼠三0酸腺苷（ATP）ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装  Horminone  中文名：7α-羟基罗列酮  分子式：C20H28O4 

小鼠软骨糖蛋白39(mouse YKL-40)   作用：   ELISA   规格：   48T/96T   进口分装  Methylprednisolone  83-43-2  中文名：甲基泼尼松龙  分子式：C22H30O5  度：98.0%  关键词： 

小鼠乳铁传递蛋白elisa试剂盒   小鼠乳铁传递蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠乳铁传递蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠乳铁传递蛋白试剂盒、小鼠乳铁传递蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Glycoursodeoxycholic acid  64480-66-6  中文名：甘氨熊脱氧胆酸  分子式：C26H43NO5  度：98.5%  关键词：  胆烷; 对照品; 标准品; 天然产物; 天然产物库

小鼠乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装           Brinzolamide  中文名：布林佐胺  分子式：C12H21N3O5S3 

小鼠乳酸脱氢酶elisa试剂盒   小鼠乳酸脱氢酶试剂盒   规格型号：96T/48T   小鼠乳酸脱氢酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠乳酸脱氢酶试剂盒、小鼠乳酸脱氢酶eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。  Glycoursodeoxycholic acid  中文名：甘氨熊脱氧胆酸  分子式：C26H43NO5
1,2,3-Triacetyl-5-deoxy-D-ribose  62211-93-2  中文名：  分子式：C11H16O7    RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit 兔子白介素3(IL-3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

Sertaconazole  99592-32-2  中文名：舍他康唑  分子式：C20H15Cl3N2OS    CLIAKitforBeta-DFELISAKit大鼠β-防御素规格：48T/96T

Doxapram  monohydrate  7081-53-0  中文名：盐酸多沙普仑  分子式：C24H33ClN2O3    细菌样品二维电泳裂解液用于细菌蛋白二维电泳

Quinestrol  152-43-2  中文名：炔雌醇环戊醚  分子式：C25H32O2    RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依赖性释放多肽(GIP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Tetracaine  94-24-6  中文名：丁卡因  分子式：C15H24N2O2    豚鼠白介素2(IL2)ELISA试剂盒 ，英文名： IL2 ELISA Kit
牛肾细胞直销病毒(PTGV)核酸检测试剂盒(-PCR法)   48T  Sitostenone  1058-61-3  中文名：豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O  度：96.0%  关键词：  苏里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库

臭氧快速试剂盒   Ozone rapid reage kit  4-(4-Fluorophenyl)-6-isopropyl-2-[(N-methyl-N-methylsulfonyl)amino]pyrimidinyl-5-yl-formyl  中文名：  分子式：C16H18FN3O3S  度：98.0%

橙   1g  Prerubialatin  1667718-89-9  中文名：  分子式：C27H20O7  度：%  关键词： 

程序性死亡因子1   英文名称：   programmed death 1   规格：   48T/96T   英文缩写：   PD1  Periplocin  13137-64-9  中文名：杠柳毒苷  分子式：C36H56O13  度：98.5%  关键词： 

成纤维细胞生长因子23   英文名称：   Human Fibroblast Growth Factor 23   规格：   48T/96T   英文缩写：   FGF-23  4-Acetamidophenol  103-90-2  中文名：对乙酰氨基酚  分子式：C8H9NO2