上海帛科生物技术有限公司
   
     
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小鼠髓样单核细胞现货供应
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:AE0732
  • 价格: ¥1200/盒
  • 发布日期: 2020-10-29
  • 更新日期: 2025-04-28
产品详请
产地 进口、国产
保存条件 低温冷藏
品牌 帛科
货号 AE0732
用途 公司产品仅用于科研
组织来源 白血病;BALB/c
细胞形态 悬浮
是否是肿瘤细胞
CAS编号
保质期 详见说明书
器官来源 详见说明书
免疫类型 详见说明书
品系 详见说明书
生长状态 详见说明书
物种来源 小鼠
包装规格
纯度 %
是否进口

基本特性:
1 )组织来源于正常人肺组织。
2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫荧光染色。
3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml
5 )肌动蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫荧光染色验证。
6 )不含有 HIV-1 HBV HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称: 小鼠髓样单核细胞现货供应
简称:WEHI-3B

种属:小鼠

来源:;BALB/c

培养基:1640

状态:悬浮

产品规格:

单位:

货号:AE0732

使用方法:
收到细胞小鼠髓样单核细胞现货供应后,请按照以下方法进行操作。
1.
取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2.
待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3.
细胞传代
1)
吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3)
用吸管轻轻吹打混匀,按1:21:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入375% CO2细胞培养箱中培养;
4)
待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。


实验操作:
1
、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45烘箱烘干(切记保持无菌),4冰箱放置,备用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3
、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4
、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗涤3次。
5
、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6
、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37水浴消化15min
7
、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按11加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8
、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9
、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105/ml 接种入培养瓶。
10
、培养:放置于375% CO2培养箱中。

操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1
)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640GIBCO,货号21875-091)90%;优质胎牛血清,10%
2
)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5% 温度:37,培养箱湿度为70%-80%
3
)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1
)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2
)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1215的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

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