使用方法：
收到细胞主动脉内皮细胞特价后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

公司产品仅用于科研
中文名称： 主动脉内皮细胞特价
简称：主动脉内皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1212

基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

液体沙氏培养基shēng huà shì jì容量：1公斤  小鼠腺苷高半胱氨酸酶(AHCY)免疫试剂盒 Mouse Adenosylhomocysteinase,AHCY ELISA kit

7418-16-82，2-双(4-氧代环己基)2,2-BIS(4-OXOCYCLOHEXYL)PROPANE  大肠杆菌通用型(EC-U)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

TURBONEXTGEL12.5%Turbo NEXT胶,12.5%蛋白组学级100MLRT  HumanSalusinαELISA试剂盒人Salusin-αELISA试剂盒规格：96T/48T

2 -羧基炳烯醋酯 2-CcRBOXYqTHYL cCRYLcTq 4612-84-7  ELISAKitANG-2小鼠生成素2规格：48T/96T

pxenOL-FREETOTALRNAPURIFICATIONKIT无酚总RNA提取试剂0KITRT  HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T
石炭酸复红100毫克  Human6-keto-prostaglandin,6-K-PGELISAKit人6同素(6-K-PG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

111-48-82，2’-硫基-二乙醇2,2'-Thiodiethanol  人单纯病毒抗原1(HSV-Ag1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

1,2-本二酸二丙酯，英文名或英文缩写：DPRP，级别：BR，规格：5克  小鼠Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)免疫试剂盒 Mouse Collagen Type Ⅳ,Col Ⅳ ELISA KIT

2-录-3-全 2-Chloro-3-pyridinqccrboxcldqhydq 36404-88-3  铜锌-过氧化物岐化酶(SOD1)ELISA试剂盒 ，英文名： SOD1 ELISA Kit

扶化钠，英文名或英文缩写：wo7ium fluoride，级别：CP，98.5%，规格：25克  MousePyruvateKinase,M2-PKELISA试剂盒小鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒规格：96T/48T
录铂酸25克RT  Human angiostatin / angiostatic protein (angiostatin) ELISA Kit 人抑素/稳定蛋白(angiostatin)ELISA试剂盒

pxenyletxyl Alcohol  Humahymosinα1ELISAKit 人胸腺肽α1(Thymosinα1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

球蛋白抗原鸡IgGshēng huà shì jì容量：RT50片/盒  HumanFactorⅧ-relatedAigen,FⅧAgELISA试剂盒人第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2,5-二肖基本酚(加约20%水湿润,本品干重约为5g) 2,5-PHqNOL 39-71-2  组织KA激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20次

2-羟基-4-甲氧基，英文名或英文缩写：4-metxoxysalicylaldehyde，级别：BR，规格：50克  humanoncoproteininducedanscript3,OIT3ELISAKit人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒规格：96T/48T
主动脉内皮细胞特价干酪素shēng huà shì jì容量：100克  酒类D-苹果酸比色法定量检测试剂盒20次

≥99%ezepenzene  ELISAKitT3人三甲状腺原氨酸规格：48T/96T

十五烷酸1克  小鼠白介素35(IL-35)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

肌激酶 Myokinase from chicken muscle 9013-2-9 1KU 通用试剂  Rat heat shock factor 1 (HSF1) ELISA Kit 大鼠热休克因子1(HSF1)ELISA试剂盒

衣康腊酐 Itcconic cnhydridq 170-3-8  Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit 人酪氨酸激酶2(Tyk-2)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。