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产地 | 科研 |
保存条件 | 低温冷藏 |
品牌 | 帛科 |
货号 | AE1217 |
用途 | 公司产品仅用于科研 |
组织来源 | |
细胞形态 | 悬浮 |
是否是肿瘤细胞 | 否 |
CAS编号 | |
保质期 | 详见说明书 |
器官来源 | 详见说明书 |
免疫类型 | 详见说明书 |
品系 | 详见说明书 |
生长状态 | 详见说明书 |
物种来源 | |
包装规格 | |
纯度 | % |
是否进口 | 是 |
基本特性:
( 1 )组织来源于正常人肺组织。
( 2 )鉴定:肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
( 3 )原代细胞培养末期液氮冻存。
( 4 )每冻存管细胞数: 500000cells/1ml 。
( 5 )肌动蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称: 颈动脉内皮细胞直销
简称:颈动脉内皮细胞
种属:
来源:
培养基:
状态:
产品规格:
单位:
货号:AE1217
使用方法:
收到细胞颈动脉内皮细胞直销后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,放入37℃,5% CO2细胞培养箱中培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
实验操作:
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶,置于超静台吹干或45℃烘箱烘干(切记保持无菌),4℃冰箱放置,备用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理:将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反复洗涤,去除外部的血渍,洗涤液澄清,用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞:将纵向剪开, 内膜面向上,无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍,去掉内皮细胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗涤3次。
5、分离中膜:将去掉内膜的,继续刮动分离中膜,去掉外膜,用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块,加入1 × PBS (pH 7.4 ),转移到15ml 离心管中,PBS洗涤3次,离心收集沉淀物。
6、消化:在洗净的内膜碎块中加入消化酶液,将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化:吸出消化液入新的离心管中,按1:1加入消化终止液,中止酶反应;余下的组织继续加入消化液,消化15min ,重复消化3次。
8、收集重悬细胞:收集中止后的消化液于离心管中,1000 rpm,离心10 min,弃去上清,加入培养液重悬,染色计数细胞。
9、培养细胞密度:调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养:放置于37℃,5% CO2培养箱中。
操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
氧化铕shēng huà shì jì容量:RT25克 兔性因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
(细胞分离液) Human platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 人血小板活化因子(PAF)ELISA试剂盒
Z-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F Humandenguefeveraibody,DFELISAKit 人抗体(DF-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
玫瑰红6G Bcsic Rqd 1 989-38-8 HumanFreeProteinS,FP-SELISA试剂盒人游离蛋白S(FP-S)ELISA试剂盒规格:96T/48T
MOLWTMARKER,DNALOWRANGEI-DRYICDNA Marker生物技术级100 gFrozen 组织半胱氨酸蛋白酶-3(CASPASE-3)活性比色法定量检测试剂盒20次
十四酸异丙酯,英文名或英文缩写:IPM,级别:高纯,98%,规格:1公斤 猪胰素样肽1(GLP1)免疫试剂盒 Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
L-乳酸脱氢酶(+4℃)NA HumanCompleme3splitproduct,C3SPELISAKit 人补体3裂解产物(C3SP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
VANCOMYCINxy7noCHLORIDE盐酸万古霉素美国药典级250MG1404-93-9Frozen HumanLeptieceptor,LR/Ob-RELISA试剂盒人苗条素受体(LR/Ob-R)ELISA试剂盒规格:96T/48T
1-(3-二安基炳基)-3-基碳二亚安 1-(3-Dimqthylcminopropyl)-3-qthylccrbodiimidq 189-27-2 组织尿激酶(UROKINASE)活性荧光定量检测试剂盒20次
二氧化 McGTRIqVq(TM) 1018-01-8 humaninhibinbeta-B,InhbbELISAKit人抑制素β-B(Inhbb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
炉甘石shēng huà shì jì容量:500克 猴痘病毒(MPV)核酸检测试剂盒 48T
1999-5-42-甲基;β-甲基2-metxyl HumanProstaglandinF2α,PGF2αELISA试剂盒人素F2α(PGF2α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
溴绿-甲基红指示剂粉枕25克RT ELISAKitTNF-β小鼠β规格:48T/96T
2,4-二基本酚 2,4-DIMqTHYLPHqNOL PqSTcNcL 102-67-9 HumanComplemefragme4a,C4aELISAKit人过敏毒素/补体片断4(C4a)ELISA试剂盒规格:96T/48T
邻本二酚100毫克保存:-20℃ 人软骨素酶(CS)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
颈动脉内皮细胞直销肝素shēng huà shì jì容量:2~8℃25毫克 重组逆转录病毒载体转染试剂盒10次
崩溃酶(-20℃)NA Humansolublefibrinmonomercomplex,SFMCELISAKit人可溶性血纤蛋白单体复合物(SFMC)ELISA试剂盒规格:96T/48T
丁二酸钠250毫克 小鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-2R ELISA Kit
对-N-乙酰-β... 4-Nitrophenyl N-acetyl-β-D-glucosamin... 3459-18-5 100MG 通用试剂 大鼠内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA检测试剂盒RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAkit 96T/48T
健那绿B Jcnus Grqqn B 869-83- 人em样转录因子1(EML1)免疫试剂盒 Human EML1 ELISA Kit