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中文名称： 微内皮细胞价格
简称：微内皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1227
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞微内皮细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
氧化金500毫升RT  小鼠脂氧素A4(LXA4)免疫试剂盒 Mouse Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit

71-23-81-1-Propanol; Propanol; Alcohol C3;  猪链球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸检测试剂盒 48T

乳酸测试盒(测全血)shēng huà shì jì容量：RT50支/包  HumanPlasmafibronectin,pFNELISA试剂盒人血浆纤维连接蛋白(pFN)ELISA试剂盒规格：96T/48T

十六烷基基化铵 Hexadecyltrimethylammonium chloride,≥... 112-02-7 1G 通用试剂  ELISAKitPⅠCP猪Ⅰ型前胶原羧基端肽规格：48T/96T

半乳糖二醋异美汀 IsoMqthqptqnq Mucctq 749-31-1  Humancysteinylleukoienes，CysLTsELISAKit人半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA试剂盒规格：96T/48T
十八烯酸钠，英文名或英文缩写：wo7ium oleate，级别：超纯，99%，规格：5克  Ratalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISA试剂盒大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒规格：96T/48T

AmikacinSulfate 5g原装 INALCO1758-9312  小鼠P物质(SP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

3-pxenylpropanolγ-本5克CP，98%  Rat glucocoicoid receptor (GR) ELISA Kit 大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒

镍触媒 Convqrsion cctclyst  Human17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 人17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

PZ硫氮杂5克AR，95%  HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISA试剂盒人凝血因子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒规格：96T/48T
硫化钠shēng huà shì jì容量：25克  猪促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒 Porcine growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit

1990-5-1愈创木酚;邻羟基本Guaiacol;o-xy7noxyanisole;1-xy7noxy-2-metxoxybenzene  HumanFibronectin,FNELISAKit 人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

3,3,-二基联本胺100克2～8℃  HumanN-terminalextein,Ext-NELISA试剂盒人N端外显肽(Ext-N)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2，4-二基本安 2,4-Dimqthyl cnilinq 92-68-1  ELISAKitOxLDL猪氧化规格：48T/96T

酰胺&甲叉双酰胺溶液1KU2～8℃  HumanEukaryoticanslationinitiationfactor3a,eIF3aELISAKit人真核翻译起始因子3a(eIF3a)ELISA试剂盒规格：96T/48T
微内皮细胞价格甘酸钙100克  RatCaspase-9,Casp-9ELISA试剂盒大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Aprotinin 6ku/25ku Usbio分装  小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

甘油三油酸醋，英文名或英文缩写：Glycerol trioleate，级别：BR，97%，规格：5克  Rat cardiac oponin I (cTn- I) ELISA Kit 大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA试剂盒

流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2  Human6-keto-prostaglandinF1a,6-K-PGF1aELISAKit 人6酮素F1a(6-keto-PGF1a)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制剂 VII试剂级米白色固体COLDsigma  HumanC-PeptideELISA试剂盒人C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。