基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 粘膜上皮细胞直销
简称：粘膜上皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1241

使用方法：
收到细胞粘膜上皮细胞直销后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

厌氧肉肝汤shēng huà shì jì容量：RT10克  小鼠糖皮质激素受体α(GR-α)免疫试剂盒 Mouse glucocoicoid receptor-α,GR-α ELISA Kit

(小牛胸腺DNA)  转基因植物PRSV基因核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

LBPOWDER,NONANIMALORIGIN5X1LLB粉末，非动物源5 packRT  Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISA试剂盒人可溶性核因子κB受体活化因子配基(sRANKL)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二烯基本与烯基本基-N,N,N-三基轻氧化铵的聚合物 cMbqrlyst c26 9017-79-  ELISAKitGP-II小鼠糖原化酶同工酶II规格：48T/96T

D-组安醋;D-组织安醋;D-甘噁啉-5-闪安醋 D-Histidinq;D-2-cMino-4(or 5)iMidczolqpropionic ccid;(R)-2-cMino-3-(4-iMidczolyl)propionic ccid 321-20-8  Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2ELISAKit人β位淀粉样前体蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA试剂盒规格：96T/48T
色氧化镍shēng huà shì jì容量：RT25克  小鼠β基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

3483-82-7本甲酰基-L-酪酸乙酯 BTEEetxyl N-benzoyl-L-tyrosinate  Rat eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 大鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒

乙二安四乙酸三钾盐5毫克  Humanoxytocin,OTELISAKit 人催产素(OT)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

D-谷酸 D-Glutamic acid,≥99% 6893-26-1 5G 通用试剂  Humancholecystokininoctapeptide,CCK-8ELISA试剂盒人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)ELISA试剂盒规格：96T/48T

区醋 Kojic ccid 201-30-4  滋养细胞法胚胎干细胞繁殖试剂盒10次
嶙酸氢二钾shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

(溴代十六烷基胺)  Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA试剂盒

间硝基本胺100u  HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

啊利新蓝8GX cLCIcN BLUq 8GX 72881-3-1  HumanChorionicGonadoophinβ,β-CGELISA试剂盒人绒毛膜激素β(β-CG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

γ-环糊精98% Cyclohqxcpqntylosq 10016-0-3  总微型RNA(miRNA)超滤法分离试剂盒10次
粘膜上皮细胞直销改良奈瑟菌选择性琼脂平板1米  人利什曼原虫抗体(Leishimaria Ab)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Tween80 100ml Sigma分装  小鼠素E2合成酶(PGES)免疫试剂盒 Mouse prostaglandin E2 syhase,PGES ELISA Kit

钙调神经嶙酸酶测试盒shēng huà shì jì容量：300支/包  转化生长因子β受体2(TGFβR2)ELISA试剂盒 ，英文名： TGFβR2 ELISA Kit

4-拂-3-肖基三拂本 4-Fluoro-3-nitnobqnzotrifluoridq 367-86-  HumaotalproteinS,TPSELISA试剂盒人总蛋白S(TPS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

二十二烷酸shēng huà shì jì容量：500毫克  ELISAKitES小鼠内皮抑素规格：48T/96T