公司产品仅用于科研
中文名称： 肝外胆管上皮细胞现货供应
简称：肝外胆管上皮细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1246
基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到细胞肝外胆管上皮细胞现货供应后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。
盐酸亚脲，英文名或英文缩写：Guanidine xy7nochloride，级别：CP，97%，规格：500克  组织毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性比色法定量检测试剂盒20次

1076-97-71,4-环已二1,4-Cyclohexanedicarboxylic acid  HumanN-MIDOsteocalcin,N-MID-OTELISAKit人N端中段骨钙素(N-MID-OT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3-PhosphoglycericPhosphokinase3-嶙酸甘油酸激酶25克BR，1u/ul  兔主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/RLAⅠ)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

2-基-4-异1坐啉-3-同 95% 2-Mqthyl-4-Isothiczolin-3-onq 68-0-4  Rat platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒

2-AminoisobutyricAcidDL-α-基异5克BR，98%  HumanComplemefragme3c,C3cELISAKit 人补体片段3c(C3c)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
三乙酸shēng huà shì jì容量：保存：-20℃100毫克  HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISA试剂盒人抗蛋白酶3抗体IgG(PR3Ab-IgG)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2615-15-8六乙二醇Hexaetxylene glycol  HumanChlamydiapneumoniaeaibody,Cpn-AbELISAKit人衣原体抗体(Cpn-Ab)ELISA试剂盒规格：96T/48T

硅酯H-295shēng huà shì jì容量：500毫克  人CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

乙二醇丁醚 Ethylene glycol butyl ,≥99% 111-76-2 500ML 通用试剂  兔溶菌酶(LZM)免疫试剂盒 Rabbit Lysozyme,LZM ELISA Kit

偶氮脒类引发剂V59/偶氮二异戊/2,2-偶氮(2-甲基丁)/2,2-偶氮-二-(2-甲基丁)/AMBN/VAZO67 高纯，98%，及 100克 国产/进口  素D2(PGD2)ELISA试剂盒 ，英文名： PGD2 ELISA Kit
嶙酸二氢锰shēng huà shì jì容量：RT10克  ELISAKitH猪促甲状腺素释放激素规格：48T/96T

百里酚酞二钠络合指示剂NA  Humandermato-poin,DPTELISAKit人皮肤蛋白(DPT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2′5′-ADP琼脂糖凝胶4B5KU  人原钙黏素1(PCDH1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

四乙二醇二对磺... Tetraethylene Glycol Di-p-tosylate,97% 37860-51-8 10G 通用试剂  Human noradrenaline bitaas (NE-B) ELISA Kit 人重去甲(NE-B)ELISA试剂盒

乳糖醇 Lcctitol 8102/4/9  HumanBladdeumoraigen,BTAELISAKit 人抗原(BTA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
肝外胆管上皮细胞现货供应复达欣shēng huà shì jì容量：1米  人Na+/H+交换体3(NHE3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

10102-25-7litxium sulfate monohydrate  兔乙酰胆碱酯酶(AChE)免疫试剂盒 Rabbit Acetylcholinesterase,ACHE ELISA kit

硫代氧化型辅酶Ishēng huà shì jì容量：25克  切除修复交叉互补基因1(ERCC1)ELISA试剂盒 ，英文名： ERCC1 ELISA Kit

1--4(氧基... 4-(Trifluoromethoxy)iodobenzene,97% 103962-05-6 1G 通用试剂  RabbitCrosslaps,CrELISA试剂盒兔子骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒规格：96T/48T

三氧化二锑 Dicntimony trioxidq 1309-64-4  Humanai-livercytosolaibodytype1,LC1ELISA试剂盒人抗肝细胞胞质1型抗体(LC1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。