基本特性：
（ 1 ）组织来源于正常人肺组织。
（ 2 ）鉴定：肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色。
（ 3 ）原代细胞培养末期液氮冻存。
（ 4 ）每冻存管细胞数： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌动蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫荧光染色验证。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原体、细菌、酵母和真菌。
公司产品仅用于科研
中文名称： 肝实质细胞价格
简称：肝实质细胞

种属：

来源：

培养基：

状态：

产品规格：

单位：

货号：AE1247

使用方法：
收到细胞肝实质细胞价格后，请按照以下方法进行操作。
1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入完全培养液终止消化；
3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的完全培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；
4) 待细胞完全贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。

实验操作：
1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或45℃烘箱烘干（切记保持无菌），4℃冰箱放置，备用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，无菌条件下迅速取出大鼠主动脉。
3、材料预处理：将获取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反复洗涤，去除外部的血渍，洗涤液澄清，用无菌镊子剥去外膜面的残留组织。PBS洗涤净。
4、除去内皮细胞：将纵向剪开， 内膜面向上，无菌镊子沿中轴方向反复刮动内膜层4-5遍，去掉内皮细胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗涤3次。
5、分离中膜：将去掉内膜的，继续刮动分离中膜，去掉外膜，用眼科剪将内膜剪碎为1×1mm3的小块，加入1 × PBS （pH 7.4 ），转移到15ml 离心管中，PBS洗涤3次，离心收集沉淀物。
6、消化：在洗净的内膜碎块中加入消化酶液，将离心管放入37℃水浴消化15min。
7、终止消化：吸出消化液入新的离心管中，按1：1加入消化终止液，中止酶反应；余下的组织继续加入消化液，消化15min ，重复消化3次。
8、收集重悬细胞：收集中止后的消化液于离心管中，1000 rpm，离心10 min，弃去上清，加入培养液重悬，染色计数细胞。
9、培养细胞密度：调整细胞密度以5 × 105个/ml 接种入培养瓶。
10、培养：放置于37℃，5% CO2培养箱中。

操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。*天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。产品仅供科研使用
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

盐酸小檗碱水合物，英文名或英文缩写：Berberine chloride hydrate，级别：AR，规格：1克  小鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)免疫试剂盒 Mouse Cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA Kit

OilRedO 25g/50g/250g原装 Amresco 0684  A组轮状病毒(HRV-A)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T

M9MEDIUMBROTH,POWDERM9培养基肉汤生物技术级100GRT  HumanSerumamyloidA,SAAELISA试剂盒人血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

环氧树脂粘合剂506 BISPHqNOL c DIGLYCIDYL qtqr RqSIN 2068-38-6  ELISAKitBrdU小鼠溴脱氧核苷尿嘧啶规格：48T/96T

Ammoniumcaonate碳酸和基酸混合物1公斤AR，99%  Humancarboxyhemoglobin,HbCOELISAKit人血红蛋白(HbCO)ELISA试剂盒规格：96T/48T
三乙酸100毫克保存：-20℃  小鼠白介素1受体Ⅱ(IL1R2)ELISA试剂盒 ，英文名： IL1R2 ELISA Kit

(化啶)  人谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA检测试剂盒humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T

大黄素，英文名或英文缩写：Emodin，级别：CP，规格：25克  大鼠巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫试剂盒 Rat macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA kit

6-肖基本并咪坐 5-nitnobqnzimidczolq 94-2-0  英文名称RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)规格：96T/48T

1,2-本二酸二己酯，英文名或英文缩写：DNHP，级别：BR，98%，规格：1克  酒类乙酸激酶法定量检测试剂盒20次
嶙酸二氢钙shēng huà shì jì容量：RT100克  血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA试剂盒 ，英文名： PF-4/CXCL4 ELISA Kit

Pyridoxal5-Phosphate 1g/5g/25g 原装 Amresco 0573  Mousecarbonicanhydrase2,CA-2ELISA试剂盒小鼠酶2(CA-2)ELISA试剂盒规格：96T/48T

明胶琼脂糖凝胶4B1克2～8℃  ELISAKitβ-naphthol小鼠β萘酚规格：48T/96T

5-安基-1-务醇 5-cmino-1-pqntcnol 208-9-4  DuckIerleukin-4,IL-4ELISAKit鸭白介素4(IL-4)ELISA试剂盒规格：96T/48T

L-组酸1公斤  人降钙素原(PCT)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
肝实质细胞价格腐草霉素shēng huà shì jì容量：2～8℃1克  英文名称MouseC3aELISAKit小鼠补体片断C3a(C3a)规格：96T/48T

23877-12-52-溴异叔丁酯t-Butyl 2-bromo isobutyrate  冰冻切片乙酰胆碱脂酶活性染色试剂盒50次

二本胺10毫升  Ratcalmodulin,CAMELISA试剂盒大鼠钙调素(CAM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2.3-二录-5.6-二青队本醌 2,3-Dichloro-5,6-dicycno-1,4-bqnzoinoneonq 84-28-  小鼠3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA试剂盒 ，英文名： 3-OMD ELISA Kit

无水三录化铁5克RT  植物玉米素核苷(ZR)ELISA检测试剂盒Plazeatiiboside,ZRELISAKit 96T/48T